- ￥680 - 1280
- KEMOBio
- 进口/国产
- KM1022138
- 2025年07月11日
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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 保存条件：
-80℃
- 保质期：
90天
- 英文名：
FUW-tetO-EGFP
- 库存：
100
- 供应商：
科淼生物
- 规格：
0.5ug/0.5ug
| 规格： | 0.5ug | 产品价格： | ￥680.0 |
|---|---|---|---|
| 规格： | 0.5ug | 产品价格： | ￥1280.0 |
英文名称：FUW-tetO-EGFP
货号：KM1022138
图谱：微客服
宿主：哺乳细胞,慢病毒
用途：蛋白表达
片段类型：ORF
片段物种：
原核抗性：Amp
真核抗性：Puro
荧光标记：绿色
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文献和实验-MEM、DMEM培养基和M-MLV逆转录酶；小牛血清；G418；DIG High PrimeDNA Labeling and Detection Starter Kit I1。 质粒 pGL3-promoter；含EBVR的质粒p220.2。 重组质粒载体pcDNA3-EGFP-EBVR的构建 采用StuI和XbaI消化p220.2，获得长4.7 kb的EBVR，包括EBV核抗原1(EBNA1)和OriP，克隆至pGL3-promotor的SV40启动子下游Hind Ill
1 、将转染后的细胞按照一定的比例接种到 6 孔板中（一般选用 1 ： 10 和 1 ： 100 两个梯度），分别采用 1200 m g/ml ， 1000 m g/ml 和 800 m g/ml 的 G418 进行筛选； 以转染携带 EGFP 质粒载体的细胞作为阳性对照，以未转染质粒载体的细胞作为阴性对照； 2 、每 3 ～ 4 天换液一次； 3 、筛选 20 ～ 30 天，即可得到稳定表达细胞株； 4 、传代后，以一定的 G418 浓度
基因免疫技术（Gene immunization technique）
核细胞的重组表达质粒pCX-EGFP-VP7的DNA用电击转染CHO细胞，48小时后收获细胞及细胞上清。 4. DNA的制备及小鼠的免疫 质粒载体pCX-EGFP-VP7经酶切鉴定的大量提取DNA，经纯化，作为免疫用DNA。Balb/C小鼠免疫。每只鼠的四头肌注射盐酸普鲁卡因，约20分钟后分组在相同部位肌肉注射约100ug纯化的pCX-EGFP-VP7或pCX-EGFP。2周后,将每组实验鼠分成两部分,一部分按以上方法再次接种同量的DNA，另一部分不再接种，作为对照继续饲养。
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