- ￥1230
- LSM Bio
- 进口
- PVTB00040-1a
- 2025年08月31日
企业认证
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- 详细信息
- 询价记录
- 文献和实验
- 技术资料
- 保存条件：
负20摄氏度
- 保质期：
3个月
- 英文名：
pET30-Egf
- 库存：
100
- 供应商：
LSMBIO
- 规格：
2ug
pET30-Egf Plasmid
Catalog No. PVTB00040-1a
Vector Backbone pET-30a(+)
Backbone manufacturer Novagen
Vector type E. coli Expression
Backbone size w/o insert 5422bp
Cloning site 5 Nde I
Site destroyed during cloning NO
Cloning site 3 Hind III
Bacterial resistance Kanamycin
Growth strain DH5alpha
Growth temperature 37 Centigrade
High or low copy High Copy
Selectable markers None
Background E. coli Expression vector of Homo sapiens epidermal growth factor
Gene Information
Alternative Gene Name URG; HOMG4
Insert Gene name Egf
Insert size 159bp
Accessions BC093731.1
Tag None
Species Homo sapiens (human)
Gene ID 1950
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- 内容
- 询问日期
文献和实验晚上每天都有人做报告，我觉得让我收获最大的是Bill Studier的报告。本来这个报告是后来才听到的，但是由于Burgess的模块是唯一的涉及大肠杆菌中表达蛋白的，我把这一段提前来说说。Studier这老哥是Brookhaven National Laboratory的，一生研究T7噬菌体，也是T7 RNA polymerase induction system（pET系列质粒）的发明者。 T7系统在大肠杆菌表达蛋白的应用实在太广泛了，但凡表达蛋白的兄弟姐妹们的不可能不知道这个系统
相关，不同的载体是不一样的。一个载体可只看它的启动子到终止子那一段，其它的可以考虑少些。 pET 表达菌株的相关信息 （ DE3 ）指宿主为 λ DE3 溶原菌，其染色体上带有一拷贝由 lacUV5 启动子控制的 T7 RNA 聚合酶基因。这类菌株适用于从克隆到 pET 载体的目标基因生产蛋白。命名为 pLysS 和 pLysE 的宿主菌带有编码 T7 溶菌酶（为 T7 RNA 聚合酶的天然抑制物）的 pET 相容性质粒。带有 pLysS 的细胞
编码区的基因片段，其由5'末端的stat密码子（ATG）和3'末端的终止密码子（TAA，TAG或TGA）结合。然后将目的基因片段插入pMD18-T载体中以构建重组质粒，通过DNA测序鉴定。用指定的酶消化重组pMD18-T质粒，并通过以下方案将检索到的目的DNA片段亚克隆到pET-32α（+）载体中以产生重组表达载体。将约129bp的TBO基因片段插入pET-32α（+）载体（5900bp）用相同的限制酶在37℃消化pET-32α（+）载体和重组pMD18-T载体1小时，然后通过在65℃温育10分钟
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