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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 库存:
252
- 英文名:
Sephadex G-15 medium
- 保质期:
长期
- 供应商:
北京百奥莱博科技有限公司
- 保存条件:
冷藏
- 规格:
25g
特别提示:包括葡聚糖凝胶G-15在内,本公司的所有产品仅可用于科研实验,严禁用于临床医疗及其他非科研用途!
产品名称:葡聚糖凝胶G-15
英文名称:Sephadex G-15 medium
产品货号:QN4108
产品规格:25g
葡聚糖凝胶G-15的分离范围是100-1500(肽)
葡聚糖凝胶是一种珠状的凝胶,含有大量的羟基,很容易在水中和电解质溶液中溶胀。G型的葡聚糖凝胶有各种不同的交联度,因此它们的溶胀度和分级分离范围也有所不同。葡聚糖凝胶的溶胀度基本上不因盐和洗涤剂的存在而受影响。
葡聚糖凝胶有不同的粒度。超细级的葡聚糖凝胶是用于需要极高分辨率的柱色谱和薄层色谱。粗级和中级的凝胶用于制备性色谱过程,可在较低的压力下获得较高的流速。另外,粗级也可用于批量工艺。
葡聚糖凝胶不溶于一切溶剂(除非它被化学降解)。它在水、盐溶液、有机溶剂、碱和弱酸性溶液中都是稳定的,在强酸中凝胶骨架的糖昔键被水解。长期接触氧化剂将破坏凝胶,因而应避免使用。
葡聚糖疑胶并不熔融,可以在湿态、中性PH进行灭菌或在高压灭菌器120℃、30分钟而不影响它的色谱性质。干态的凝胶加热至120℃以上将开始焦糖化。葡聚糖凝胶的机械强度取决于交联度。
使用方法:
1.葡聚糖凝胶预处理:
在室温下,将葡聚糖凝胶干粉浸泡于蒸馏水中至少24小时,并不断搅拌以保证凝胶溶胀,或者用蒸馏水煮沸至少1小时直至充分溶胀,凝胶体积不再变化。
注:在溶胀前,加入蒸馏水搅拌后使其自然沉降,沉降后若上层溶液中漂浮的凝胶碎片颗粒较多,需要重复多次漂洗将其除去,防止层析时阻塞凝胶柱,影响流速。
2.装柱:
将溶胀好的凝胶根据装柱要求一次性置入柱内,注意保持湿态装柱,并避免柱内产生气泡或断层; 装柱要均匀,可在凝胶耐受的操作压下装柱,装好的凝胶柱可以检测柱效,检测过滤柱装填是否合格。
凝胶层析分离度取决于柱高,为分离不同组分,凝胶柱床必须有适宜的高度:分级分离时,一般需要100cm左右长的层析柱,柱高与直径之比为20~100:1,柱高过高时,凝胶挤压变形阻塞会引起较大的反压,应当尽可能避免;分组分离(例如脱盐)时用短柱,柱高控制在40~50cm以下,柱高与直径的比约为5~10:1。
3.平衡:
上样前用平衡液平衡层析柱至少3~5个柱体积直到记录仪基线变得平稳为止(例如流出液的pH值等于上柱的Buffer的PH值);
4.上样:
分级分离时上样量一般为5%的柱床体积,我们建议初次上样控制在1-2%的床体积,视分离情况可以调整;脱盐时上样量可以达到20%的柱床体积。
样品溶液如有杂质或沉淀应过滤或离心除去,样品的粘度不能过高,否则影响分离效果。
5.洗脱方法:
可以用无盐水,也可以采用上柱时的缓冲液洗脱;在上柱缓冲液中加入NaCl等梯度洗脱或盐梯度洗脱也可以完全分离纯化;
6.在位清洗(CIP)
凝胶使用十次后作一次CIP,目的是去除柱床内沉淀的及顽固残留的蛋白。方法是以40cm/h用1M氢yǎng化钠反向清洗四个柱体积,再以至少三个柱体积平衡缓冲液再生。
7.保存
凝胶柱暂时不用,可将其回收,一般方法是将凝胶用水冲洗干净滤干,可加入0.02%叠氮huà钠防腐或用20%乙醇浸泡,以控制微生物生长。
我公司销售的葡聚糖凝胶G-15,Sephadex G-15 medium质量上佳,价格普惠,欢迎广大新老客户踊跃订购。
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文献和实验SephadexG-10葡聚糖凝胶 G-10 分离范围Sephadex G-15 葡聚糖凝胶 G-15 分离范围Sephadex G-15 葡聚糖凝胶 G-15 分离范围Sepharose 6B 琼脂糖凝胶 6B 分离范围:1000-5000,适用于脱盐、肽与其它小分子的分离ConA-Sepharose ConA琼脂糖凝胶 分离范围:1000-5000,适用于脱盐、肽与其它小分子的分离Sephadex G-25 Medium 葡聚糖凝胶 G-25 中 分离
小。G值表示每克干胶吸水量(mL)的十倍。例如Sephadex G-25其吸水量应为2.5mL/g干胶。常用的葡聚糖凝胶有多种规格,如G-10、G-15、G-25、G-50、G-75、G-100等。实验中选用何种型号应根据被分离的混合物分子的大小及工作目的来确定(参见附录五)。 2. 分离原理 当混合样液加到凝胶柱上,随着洗脱剂而通过凝胶柱时,分子大小不同的物质受到不同的阻滞作用。颗粒接近或大于网眼的分子,不能进入凝胶的网眼中,在重力作用下它们随着溶剂在凝胶颗粒
的核酸凝胶染色试剂,能够在多数应用中提供可以接受的灵敏度,但它是一种高诱变性的化学物质。而且EB染色后具有较高的背景荧光信号。 SYBR Green I 和 SYBR Gold 也被厂家宣传为最灵敏的凝胶染色试剂。但 SYBR Green I 尤其是 SYBR Gold 在常用的微碱性电泳缓冲溶液或预制凝胶中会快速降解,稳定性差导致染色效果极不可靠。SYBR safe 被认为是市场上较为安全的核酸染料,但它的染色效果还远不及 SYBR Green I 。 Goldview从相似性对比试验结果来看
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