- ¥280
- Signalway Antibody
- cs001
- 2025年07月10日
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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 保质期：
一年
- 保存条件：
A液和B液-20℃避光保存。 C液2-8℃保存
- 规格：
100T
Hoechst33342/PI双染细胞凋亡检测试剂盒是采用DNA探针双染细胞核的方法检测细胞的状态。Hoechst33342染色液A可以透过正常细胞膜，而细胞凋亡后，细胞膜对Hoechst33342染色液A的通透性增加，PI染色液B不能透过细胞膜，对正常细胞和凋亡细胞不能染色，而对坏死细胞可以染色。用两种染色液对细胞进行双染后，使用流式细胞仪或荧光显微镜即可对细胞状态进行检测。在双变量流式细胞仪的散点图上，这三群细胞表现分别为：正常细胞为低蓝色/低红色（A+/B+），凋亡细胞为高蓝色/低红色（A++/B+），坏死细胞为低蓝色/高红色（A+/B++）。
使用方法：
- 染色缓冲液的配制：
- 收集样本细胞，细胞数量在10X105个以内。
- 用PBS洗涤细胞两次。
- 用500μL-1ml 染色缓冲液将细胞重悬。
- 加入5-10ul Hoechst33342染色液A。
- 加入5-10ul PI染色液B。
- 轻轻混匀后4℃避光孵育10-20分钟。
- 用PBS洗涤细胞。
- 用流式细胞仪或荧光显微镜检测结果。HO33342用紫外光激发，PI用蓝光激发。Hoechst33342-DNA复合物的最大激发波长为350nm，最大发射波长为460nm，PI-DNA复合物的最大激发和最大发射波长分别为488nm和615nm。
结果分析 ：
正常细胞为低蓝色/低红色（A+/B+），凋亡细胞为高蓝色/低红色（A++/B+），坏死细胞为低蓝色/高红色（A+/B++）。
形态学：正常细胞核形态呈圆形，淡蓝色，内有较深的蓝色颗粒；凋亡细胞的核呈亮蓝色，或核呈分叶状，碎片状。坏死细胞核红色。
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文献和实验示例： Jurkat细胞用1μM喜树碱(Camptothecin) (左)或未加药 (右)处理4h，FITC-Annexin V/PI荧光双染细胞凋亡检测试剂盒染色后，流式细胞仪荧光检测。 Annexin V-FITC单阳性细胞为早期凋亡细胞，Annexin V-FITC和PI染色双阳性的细胞为坏死细胞或者晚期凋亡。PI单染色阳性位裸核细胞。 实测数据可能会因细胞类型、细胞凋亡情况，检测仪器等的不同而存在差异，图中数据仅供参考。 流式检测细胞凋亡的数据分析方法： 1） 选中所有颗粒，将FSC
brightpearl：我欲观察多种药物对神经细胞凋亡的影响，工作量较大，现市售细胞凋亡试剂盒TUNEL用于培养皿。有没有可用于96孔培养板的细胞凋亡试剂盒？ XTYang：bdbiosciences下属clontech子公司有的 个人做调亡的体会 ljksbs 如果是做细胞调亡的形态学观察，姬姆萨染色比较好；现在检测调亡比较流行的是Annexin-V FITC/PI双染，将细胞分为正常细胞，早期调亡细胞，晚期调亡细胞或继发性坏死细胞，机械性损伤细胞四个区域，比较敏感，不错。 DNA Ladder 法检测
脂酰丝氨酸与凋亡早期细胞的胞膜结合。因此Annexin V被作为检测细胞早期凋亡的灵敏指标之一。将Annexin V进行荧光素（FITC）标记，以标记了的Annexin V作为荧光探针，利用荧光显微镜或流式细胞仪可检测细胞凋亡的发生。 2. Q：用流式作细胞凋亡为什么跟tunel差别那么大啊？ A：tunel测出来的细胞凋亡率大概有30%而作流式测出来的凋亡率只有2%（阴性对照0.5%）差别好大啊，用的是beckman公司的Annexin V /PI双染试剂盒，实验步骤如下：
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