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文献和实验说起提取质粒,想必是做分子生物学的搬砖工们每天的常规工作。随着各大公司开发出各种质粒提取 kit,为苦逼的生物狗带来了福音—试剂再也不用自己配了,提取步骤再也不用那么繁琐了。但,你先别着急高兴,久而久之,很多刚进实验室的小白师弟师妹再也不懂得背后的原理:质粒提取出来掺杂有蛋白或者基因组 DNA 怎么办?待转染或酶切的质粒被有机溶剂污染了怎么办?且听我一一道来。质粒是独立于基因组外的小型环状 DNA 分子,能够自我复制,在分子克隆中是最常用的外源基因载体。在自然状态下,质粒常存在于细菌中,携带
【基本原理】此试剂盒用于质粒DNA小量纯化。该试剂盒采用了传统的SDS碱裂解法,结合DNA制备膜技术,具有高效、快速、方便之特点,全套操作只需1小时便可完成。使用本试剂盒可从1-4ml 的过夜培养的菌液中纯化得到1~20μg的高纯度质粒DNA,此质粒DNA可直接用于DNA序列分析以及各种酶促反应等。【器材】1.离心机2. Spin Column3. Collection Tube (2ml)*1初次使用试剂盒时,请将RNase A1全部加入到SolutionI中,混合均匀后4℃保存。*2若出现
相关专题 成功走出第一步:DNA提取 一、从在含20 mg/l Kanamycin和15 mg/l Gentamycin 5-8 ml的液体LB培养基中接种Agrobacterium 细胞,然后在28℃、200-220 rpm培养24 h。然后进行质粒 提取。 二、新鲜配制Sol II溶液(880 µl H2O, 100 µl SDS 10%, 20 µl 10 N NaOH),及包含 4 mg/ml溶菌酶Lysozyme
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