大肠杆菌蛋白提取试剂盒北京厂家

特别提示：包括大肠杆菌蛋白提取试剂盒在内，本公司的所有产品仅可用于科研实验，严禁用于临床医疗及其他非科研用途！

产品名称：大肠杆菌蛋白提取试剂盒
英文名称：Escherichia coli protein extraction kit
产品货号：HR0065
产品规格：50T|100T

大肠杆菌总蛋白提取试剂盒可以从各种菌体中提取总蛋白，可用于纯化蛋白的粗品制备及总蛋白制备。提取过程简单方便。该试剂盒含有蛋白酶抑制剂混合物和磷酸酶抑制剂混合物，阻止了蛋白酶对蛋白的降解，为提取高质量的蛋白提供了保证。该试剂盒提取的蛋白具有天然活性，可用于报告基因检测、SDS-PAGE电泳检测、Western blotting、凝胶阻滞实验、免疫共沉淀、酶活分析等下游实验。每毫升菌液大概可以提得5-10mg蛋白。采用BCA或Lowry 法进行蛋白定量。

储存条件：蛋白稳定剂、蛋白酶抑制剂-20℃保存；磷酸酶抑制剂2-8℃保存；蛋白提取液室温保存。
有效期：一年。

注意事项：
●本试剂盒仅供科学研究使用，不可用于诊断或治疗。
● 螺旋盖微量试剂管装的试剂在开盖前请短暂离心，将盖和管内壁上的液体离心至管底，避免开盖时试剂损失。
● 禁止与其他品牌的试剂混用，否则会影响使用效果。
● 最好使用一次性吸头、管、瓶或玻璃器皿，可重复使用的玻璃器皿必须在使用前清洗并彻底清除残留清洁剂。
● 避免皮肤或粘膜与试剂接触。

产品特点：
1．使用方便：不需昂贵设备。
2．可以处理各种细菌菌体，包括新鲜菌液和冰冻菌体。
3．将蛋白提取的时间缩短至 30分钟-1小时。
4．采用温和的中性裂解组分，保持蛋白活性。
5．含蛋白稳定剂，提取的蛋白稳定。
6．紫外检测蛋白浓度时，背景干扰低。
7．蛋白酶抑制剂抑制了蛋白的降解，蛋白酶抑制剂配方优化。蛋白酶抑制剂混合物包含6种独立的蛋白酶抑制剂；每一种抑制剂可特异性抑制某一种或几种蛋白酶活性。
该混合物优化的组成使其可以抑制几乎所有重要的蛋白酶活性，包括丝氨酸蛋白酶、半胱氨酸酸蛋白酶、天冬氨酸蛋白酶、丙氨酰-氨基肽酶等。
8．本试剂盒中不有 EDTA，与金属螯和层析等兼容。

试剂盒以外自备试剂和仪器：
● 移液器、吸头 ●离心机及离心管
● 涡旋振荡器 ●冰箱，冰盒

使用方法：

使用注意事项：
1．旋帽离心管装的试剂在开盖前请短暂离心，将盖内壁上的液体甩至管底，避免开盖时液体洒落。
2．实验过程中的所有试剂须预冷；所有器具须放-20℃冰箱预冷。整个过程须保持样品处于低温。
3．蛋白酶抑制剂储存期间溶液如果出现沉淀，不影响使用，溶解后正常使用。
4.可以根据自己实验需要加入其它蛋白酶抑制剂单品。
5．本试剂盒中提取液和蛋白酶抑制剂中均不含 EDTA，根据需要可自行加入。
大肠杆菌蛋白提取
1．提取液的准备：根据所需要提取的样本量，每500μl提取液中加入2μl蛋白酶抑制剂混合物和2μl磷酸酶抑制剂混合物和5μl蛋白稳定液，充分混匀后置冰上备用。
2．在4℃，12000RPM条件下将菌液离心5分钟，弃上清，尽量吸干剩余液体，收集菌体，用PBS洗菌体2次。若为冷冻菌体直接进行下面操作步骤即可。
3．按每20mg湿重菌体样本加入500μl蛋白提取液，混匀，冰上放置20-30分钟，中间每隔几分钟涡旋振荡混匀或用移液器吹打混匀。
4．300w，10s超声/10s间隔条件下冰浴超声至菌液变清。
5．在4℃，12000RPM条件下将菌液离心5分钟，将上清移入冷的干净离心管。
6．即得到大肠杆菌总蛋白样品。
7．将总蛋白样品定量后分装置于-80℃冰箱或直接用于下游实验。

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