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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 样本:
血清、血浆、组织液等液体样本
- 库存:
100
- 标记物:
HRP(辣根过氧化物酶)
- 适应物种:
人、动物
- 应用:
科学研究
- 检测方法:
酶联免疫
- 检测范围:
1.37-1,000pg/mL
- 供应商:
上海烜雅生物科技有限公司
- 规格:
96T
英文名称:CLIA Kit for FMS Like Tyrosine Kinase 3 Ligand (Flt3L)
简称:FLT3LG; FLT3-LG; Flt3-L; FL; Fms-Related Tyrosine Kinase 3 ligand; SL cytokine
物种:Homo sapiens (Human,人)
实验方法:双抗夹心
反应时长:3h
检测范围:1.37-1,000pg/mL
灵敏度:最小可检测剂量小于等于0.63pg/mL.
样本类型:Serum, plasma, tissue homogenates, cell lysates, cell culture supernates and other biological fluids
特异性:本试剂盒用于检测FMS样酪氨酸激酶3配体(Flt3L),经检测与其它相似物质无明显交叉反应。
由于受到技术及样本来源的限制,不可能完成对所有相关或相似物质交叉反应检测,因此本试剂盒有可能与未经检测的其它物质有交叉反应。
精密度:精密度用样品测定值的变异系数CV表示。CV(%) = SD/mean×100
批内差:取同批次试剂盒对低、中、高值定值样本进行定量检测,每份样本连续测定20 次,分别计算不同浓度样本的平均值及SD值。
批间差:选取3个不同批次的试剂盒分别对低、中、高值定值样本进行定量测定,每个样本使用同一试剂盒重复测定8次,分别计算不同浓度样本的平均值及SD值。
批内差: CV<10%
批间差: CV<12%
应用(仅供研究使用,不用于临床诊断!)
实验原理:将FMS样酪氨酸激酶3配体(Flt3L)抗体包被于96孔微孔板中,制成固相载体,向微孔中分别加入标准品或标本,其中的FMS样酪氨酸激酶3配体(Flt3L)与连接于固相载体上的抗体结合,然后加入生物素化的FMS样酪氨酸激酶3配体(Flt3L)抗体,将未结合的生物素化抗体洗净后,加入HRP标记的亲和素,再次彻底洗涤后加入底物。加入底物后会产生辉光型光信号。发射光强度和样品中的FMS样酪氨酸激酶3配体(Flt3L)呈正相关。用化学发光仪测定相对光单位(RLU),计算样品浓度。
实验流程:
1. 实验前标准品、试剂及样本的准备;
2. 加样(标准品及样本)100µL,37°C孵育1小时;
3. 吸弃,加检测溶液A100µL,37°C孵育1小时;
4. 洗板3次;
5. 加检测溶液B100µL,37°C孵育30分钟;
6. 洗板5次;
7. 加TMB底物90µL,37°C孵育10-20分钟;
8. 加终止液50µL,立即450nm读数。
稳定性:经测定,试剂盒在有效期内按推荐温度保存,其活性降低率小于5%。
为减小外部因素对试剂盒破坏前后检测值的影响,实验室的环境条件需尽量保持一致,尤其是实验室内温度、湿度及温育条件。其次由同一实验员来进行操作可减少人为误差。
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文献和实验105重悬的细胞,300 g离心5 min,弃上清。加入500 μL稀释成1 ×的Annexin V Binding Buffer工作液重悬细胞。 细胞悬液中加入5 μL的荧光素标记-Annexin V和5 μL的细胞核染色液。 轻柔涡旋混匀后,室温避光孵育15~20 min。 反应完成后立即上机检测。如不能及时检测,请于冰上避光静置并于1 h内完成检测。 检测 1)流式细胞仪检测 处理好的样本在流式细胞仪上检测。 2)荧光显微镜分析 取一滴用荧光素-Annexin V/细胞核染色液双染的细胞
【求助】新手 请问western-blot测NF-KB、FLT3是用总蛋白提取试剂盒吗
Anti-Flt-3, extracellular region,是针对flt3胞外段的抗体 Anti-Flt-3, cytoplasmic domain,是针对flt3胞内段的抗体 Flt-3 Ligand, recombinant human,是重组的Flt-3的配体,如果能作为抗体用的话应该是针对flt3的活性位点。不过如果是做western-blot的话,由于要蛋白要变性,变性后活性位点是否还存在不得而知,最好不要用这种,而且这种量少啊,才10 µg,估计比较贵吧。
操作步骤 1. 样本处理 血清样本处理:将血清样本10倍稀释(取新鲜血清10μl加入0.5ml离心管内,再加入TIMP-1稀释液90μl),用移液器充分混匀,待测。 2.标准品稀释 将标准品(8.0μg/ml)4000rpm离心10秒后,10倍稀释(取10μl加入0.5ml离心管内,再加入TIMP-1稀释液90μl),用移液器充分混匀,标记为“原管”。另取4支0.5ml离心管,分别加入TIMP-1稀释
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