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文献和实验。 图 1. 富集质膜组分后检测跨膜蛋白更易检出:目的蛋白 SGL1 是跨膜蛋白,使用总膜蛋白检测困难,使用柱式法质膜及细胞组分分离试剂盒富集质膜后再检测质膜组分,可以显著提高 SGL1 的检出效率。 (图片来源:Kashiwagi Y,2015,PLoS ONE 10(6):e0130605. doi:10.1371/journal.pone.0130605.) (3)有条件诱导目的蛋白表达 如果通过增溶目的蛋白或分离亚细胞结构富集目的蛋白,仍无法得到 WB 条带,可通过查阅相关
错,lncATLAS 也没有错。因为细胞各组分的测序数据中都有 MALAT1 的序列,MALAT1 更多的表达在核里而已。小伙伴们,总结一下 lncATLAS 的特征:发明了 RCI 值,定量亚细胞定位的可信度,同时参考表达丰度,以可发表的数据图的形式表现 lncRNA 亚细胞定位信息。因为不同的细胞,lncRNA 的亚细胞定位不一样,想快速确定 lncRNA 的定位,FISH 定位需要有严格的技术要求,那么胞浆胞核分离确定定位情况将是不错的选择,下方的胞浆/胞核分离试剂盒值得一试,扫描二维码或点击阅读原文可查
分离后通过免疫沉淀或免疫印迹检测细胞内特定蛋白质的移动。例如,对某个细胞系中某个对质膜蛋白转运有影响的特殊因子感兴趣,可以用这个因子处理细胞,处理后的细胞通过离心富集。然后将处理过的细胞和没有处理过的细胞分别分离成不同组分。许多传统方法和商业试剂盒可以将细胞/组织分离成亚细胞结构例如胞浆,质膜,细胞器和细胞核。通过使用特异性抗体免疫印迹对比目标膜蛋白的分布。这种研究方法的基本要求是分离出的亚细胞组份必须相对干净。在市场上有许多细胞组分分离试剂盒,但是通常都具有显著的交叉污染,所以仔细选择细胞组分分离试剂盒
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