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文献和实验发光基团pNA游离出来,可通过酶标仪或分光光度计(λ=405nm 或400nm)测定其吸光值,通过测定吸光度来检测Caspase的活性。 二、自备试剂 PBS、蛋白定量试剂盒(Bradford法,选用) 三、实验操作指南 1.准备工作: A、 裂解液溶解后混匀,冰浴备用。 B、 裂解液工作液制备:每50 μL裂解液中加入0.5 μL DTT,冰浴备用。 2.样本处理: A、悬浮细胞 1) 诱导完成后的细胞,2000 rpm离心5 min,弃上清,收集细胞,PBS轻轻重悬细胞并计数
正确的获得样品中待测物质的浓度值。其实,在一个长的区间内,Logistic应该都能拟合得较为理想。但并不是说它就是万能的。事实上不仅是ELISA,其它很多生物学反应都是S形曲线,也都可以用Logistic曲线拟合。但建模型是一回事,而用它来定量是另一回事。如果用来定量,S形曲线的中间段(较陡处)是比较好的,而两端的平坦部分计算误差会大,有时甚至会很大。国内外的定量试剂盒往往严格规定了较窄的使用浓度范围,实际上是一种偷懒得做法,为了避免叫你选择不同类型的标准公式。备注:以上为Winking对网友关于此
因治疗用质粒 Q Sepharose XL,SOURCE 15Q,STREAMLINE Q,Sephacryl S500,Plasmidselect 在下游纯化中,可应用不同层析技术在纯化生物分子的同时,去除各种污染物。 1.去除——内毒素 内毒素又称热原。含脂肪A、糖类和蛋白,是带负电的复合大分子。 内毒素的脂肪A部份有很强的疏水性。但在高盐下会凝集,无法上疏水层析。利用疏水层析试验盒(17-1349-01)可选择结合目标蛋白的介质而去除内毒素。内毒素与阴离子交换介质Q或DEAE
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