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文献和实验解离/非解离native缓冲液系统很多应用蛋白质聚丙烯酰胺凝胶区带电泳(zone electrophoresis)的研究使用一种缓冲液系统,该系统的设计把所有的蛋白质分解成单一多肽亚单位。最常用的解离试剂是十二烷基硫酸钠(SDS),一种离子型去污剂,它通过包围在多肽骨架的周围变性蛋白质。在包含有过量的SDS和巯基试剂的蛋白质样品,100℃加热时,二硫键被打开,蛋白质完全解离成它的亚单位。在这些情况下,大部分的多肽以一个恒定的重量比率(1.4g SDS:1g多肽)结合多肽。与去污剂所提供的负电
冰醋酸调节pH值至5.2 3.加去离子水将溶液定容至100ml 4高温高压灭菌后,室温保存。 #Buffer# 组份浓度:137 mM NaCl, 2.7 mM KCl, 10 mM Na2HPO4, 2 mM KH2PO4 配制量:1 L 配制方法: 1. 称量下列 试剂 ,置于1 L烧杯中。 2. 向烧杯中加入约800 ml的去离子水,充分搅拌溶解
细胞。 使用简单 由于省掉了电转杯,转染过程也更为简化:只需将细胞和核酸吸入Neon移液器吸头中,再插入到移液器吸头架上,并按“Start”即可。转染过后,直接将细胞加入培养容器中。既没有繁琐的移液,也不需要清洗电转杯。而且,通用的试剂盒适用于所有细胞类型,不用购买多个试剂盒,也无需鉴定最佳缓冲液。当然,一次性使用的24K金电极吸头成本不低。因多次使用会导致金包被变薄,改变吸头的电导率,所以每个吸头最多只能使用两次。 一直是经典——Lipofectamine® 2000
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