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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 库存:
99
- 细胞类型:
科研
- 物种来源:
鼠/人/其它
- 细胞形态:
上皮样/成纤维样/其它
- 运输方式:
常温运输/干冰运输
- 生长状态:
贴壁/悬浮
- 规格:
25T
细胞常规说明:
培养条件:89%基础培养基+10%FBS+1%双抗
冻存液成分:10%DMSO+40%FBS+50%基础培养液
细胞质检情况:不含细菌、真菌、支原体等微生物污染
传代建议:1:2~1:3传代,2~3天换液1次
特别提醒:签收细胞后,如细胞状态不佳,或培养中遇到问题,烦请当天尽快联系,以便处理。当天及时反馈细胞情况和细胞照片是售后跟踪处理重要的参考依据,请务必重视。
悬浮细胞接收后的操作流程与注意事项
1.如签收时出现培养瓶壁破裂,漏液等情况请及时做好照片记录并联系实验室
2.拧松瓶盖,细胞瓶竖立培养8h(或过夜)
3.待细胞沉底后吸除上层液体(含碎片残渣,请小心操作),然后吸取沉底的细胞层(2ML左右转移到新的培养瓶,加入新鲜的完全培养基(如细胞状态较差可将血清浓度调高到15%)继续培养
悬浮细胞常规培养传代流程(请严格遵照无菌操作)
1.将培养瓶/皿中的细胞重悬混匀
2.吸取2/3或者一半混匀后的细胞悬液到新的培养瓶/皿
3.分别在原瓶/皿和新分瓶的培养瓶/皿加入等量或者2倍的新鲜培养基,使细胞密度保持在5 X10(5) /ml左右
4.注意培养基PH值变化情况和细胞密度,定期半量换液(每周2-3次),待细胞密度大于2 X 10(6) /ml以后重复1项操作或者冻存
贴壁细胞接收后的操作流程与注意事项
1.收到细胞当天尽快更换新鲜完全培养基,第二天再进行消化处理
2.如果细胞收到时呈悬浮或者部分悬浮的状态,请将悬浮的细胞即时离心,加15%血清的完全培养基到新的培养皿/瓶继续培养观察。同时原培养瓶中剩下的贴壁细胞更换为15%血清的完全培养基,培养观察
3.若出现生长不均:贴壁细胞若出现分布不均,成岛状生长,可将细胞进行消化,重悬打散细胞,加入新鲜培养基进行培养
贴壁细胞常规培养传代流程(请严格遵照无菌操作)
1.吸出原培养瓶中的培养基,PBS缓冲液润洗细胞两次,加适量0.25%胰酶进行消化细胞(注意把握消化时间)
2.镜下观察消化情况,在细胞边缘缩小,贴壁松动时(不建议消化到细胞漂浮)去掉胰酶,加6~8ml 完全培养基,轻轻吹打细胞层,尽量把细胞层吹落,吹散
3.取部分细胞悬液转移到新的培养皿/瓶中,添加适当的完全培养基,把细胞悬液打匀,于培养箱中培养
4.注意培养基PH值变化情况,定期换液(每周2-3次),待细胞密度达到80%以后重复1项作或者冻存
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文献和实验PriCells: 小鼠乳腺上皮细胞培养 实验材料: 1. 10-12周龄妊娠小鼠乳腺组织 2. 不含Ca 2+ 和Mg 2+ 的1×PBS,添加200000IU/L青霉素、200mg/L链霉素和200000U/L庆大霉素,pH7.4 3. FBS、含5%牛血清白蛋白(BSA)的PBS
趣味研究 | Nature:胸小的原因找到了,原来是.....
α 的水平。图 1作者先是构建乳腺上皮细胞敲除 TSC1 小鼠动物模型,看出来了吗?妥妥的乳腺发育迟缓。具体我们看上图。图 1 中的 e、f、g 表示通过免疫印迹和免疫组织化学来验证小鼠是 TSC1 敲除。a、b、c、d 是将 6 周龄小鼠(TSC1 敲除和未敲除)的第 4 个乳腺发育对比,TSC1 敲除小鼠乳腺发育迟缓,主要是对比 TEBs 和乳腺分支。怎么办呢?图 2加入 mTORC1 抑制剂雷帕霉素 ,TSC1 敲出模型 p-S6 水平上调,乳腺重新发育,修复了 TSC1 缺失引起的发育问题。上述
模型主要分为三类:化学诱导模型、移植瘤模型和基因修饰自发肿瘤模型。 一、化学诱导模型 是指通过注射致癌物质如二甲基苯蒽等诱发小鼠乳腺癌。诱导模型构建简单,诱变剂选择范围大且稳定,诱发成癌率较高,类似于人体肿瘤细胞动力学特征,可用于乳腺癌预防及早期致癌因素的研究。但诱发模型肿瘤发生位点不可预知,同一动物可能有多个肿瘤出现,且肿瘤细胞形态学差异大,不适用于抗癌药物的研究。 二、移植瘤模型 将乳腺癌组织和细胞直接接种于实验动物而建立的模型,在基础研究中应用广泛。根据移植物来源可分为同种移植和异种移植,同种
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