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文献和实验实验,其实对聚合酶的要求挺高的。实验室里的师兄师姐一般都买进口的高保真酶。有一次,我听信了一位销售人员,他们在促销。结果我比较背,当时那还是一个新牌子,国产的,性能都还不稳定的,我就这样当了炮灰。 结果,我浪费了 1 个月的时间。这也就算了,谁知道后面临毕业的时候,用这个酶构建出来的重组菌保存遇到了问题,谁能想,复苏的时候基因还突变了呢?幸好当时用了其他的酶也克隆了,才躲过一劫。 但从那以后,我心里是有阴影了。同是科研人,相煎何太急? 哪些东西
,但结果快,二者对人均有损害性,现在已有改用无放射性的生物素标记探针. (3)分型.目前有分型和不分型二种探针,一般讲分型在病因学和流行病学上更有意义. (4)存在问题.除了要进一步提高特异性和敏感性外,还要解决快速、早期诊断、降低试验成本和简化试验条件. (四)抗体检测 所有用于检测抗原的免疫学方法经适当改良后,均可用于抗体的检测,如IFA、ELISA、RIA、LA......由于抗原方法的敏感性提高和PCR技术的应用,使得HSV抗体在HSV感染个体中的不均一性和不稳定性影响
过氧化酶HRP和碱性磷酸酶AP或其衍生物APAAP,PAP),荧光基团(FITC、 Rhodamine、Texas Red、PE、Rhodamine、Dylight等)、生物素、金颗粒。选用哪种探针的二抗主要取决于具体的实验。对于Western Blot和ELISA,最常用的二抗是酶标二抗;而细胞或组织标记实验(细胞免疫化学,组织免疫化学,流式细胞术)中通常使用荧光基团标记的二抗,免疫组化中也可以使用辣根过氧化酶或碱性磷酸酶标记的二抗。如果想要更大程度的放大检测信号,可以使用Biotin/Avidin检测
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