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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 库存:
384
- 英文名:
Streptavidin
- 保质期:
长期
- 供应商:
北京百奥莱博科技有限公司
- 保存条件:
冷藏
- 规格:
1ml/10ml/100ml
特别提示:包括1μm链霉亲和素磁珠在内,本公司的所有产品仅可用于科研实验,严禁用于临床医疗及其他非科研用途!
产品名称:1μm链霉亲和素磁珠
英文名称:Streptavidin
产品货号:CZ016
产品规格:1ml/10ml/100ml
产品简介:
链霉亲和素-生物素(SA-Biotin)系统具有极高的结合亲和力(Kd=10^-15),在生物领域具有广泛的应用。Streptavidin采用蛋白偶联技术将SA共价连接于固相载体表面,可高效结合生物素化抗体、核酸、蛋白等配体分子。本产品采用超顺磁性微球,粒径均一、形貌规整,有利于方便、快捷地捕获目标分子以及实现磁性分离。本产品可配套自动化设备进行高通量操作。
结合生物素化分子操作流程(本操作以适用于链霉亲和素磁珠系列所有产品,详见产品列表):
1. 使用前准备
1.1 缓冲液:以下为常用的缓冲液成分,用户可根据需要调整缓冲液的盐浓度及pH
1.2 Buffer I(适用于结合生物素化核酸):10 mM Tris-HCl(pH 7.5),1 mM EDTA,1 M NaCl,0.01%~0.1% Tween-20
1.3 Buffer II(适用于结合生物素化抗体/蛋白):PBS,pH 7.4,含0.05% Tween-20,可根据需要添加0.01%~0.1% BSA
1.4 磁性分离器:可选用磁性分离器,Cat.No.60201,适用于1.5 mL、2 mL或15 mL离心管
1.5 漩涡振荡器
1.6 旋转混合仪
1.7 移液器及吸头
1.8 合适的离心管
2. 结合生物素化核酸
2.1. 将磁珠瓶置于漩涡振荡器上20 s,振荡重悬磁珠。用移液器移取100 μL磁珠到新的离心管中。将离心 管置于磁性分离器上,静置1 min(此操作后续简称为磁性分离),用移液器吸去上清液,从磁性分离器上取下离心管。
备注:用户可根据生物素化分子的多少,参考产品信息表中磁珠的载量,计算需要取用的磁珠量。建议生物素化分子的加入量为磁珠载量的1~2倍,使磁珠饱和。
2.2. 加入1 mL Buffer I到离心管中,盖上离心管盖,充分振荡重悬磁珠。磁性分离,移去上清液。
备注:当步骤2.1取用磁珠体积大于1 mL时,加入与磁珠体积相同的Buffer I。
2.3. 重复“步骤2.2”一次。
2.4. 加入500 μL的用Buffer I稀释的生物素化核酸(使磁珠浓度为2 mg/mL),充分振荡重悬磁珠。将离心管置于旋转混合仪上,室温旋转混合30 min。
2.5. 磁性分离,将上清液转移至新的离心管。
2.6. 按“步骤 2.2”的方法洗涤磁珠三次。
2.7. 根据后续实验的要求,加入合适的低盐缓冲液,重悬磁珠。至此结合生物素化核酸步骤完成。磁珠可用于后续操作。
2.8. 用户可以通过测定反应前后核酸的浓度,计算结合到磁珠上的核酸量﹝(反应前浓度-反应后浓度)×反应溶液体积﹞。
3. 结合生物素化抗体/蛋白操作流程
3.1 将磁珠瓶置于漩涡振荡器上20 s,振荡重悬磁珠。用移液器移取100 μL磁珠到新的离心管中。磁性分离,用移液器吸去上清液,从磁性分离器上取下离心管。
备注:用户可根据生物素化分子的多少,参考产品信息表中磁珠的载量,计算需要取用的磁珠量。建议生物素化分子的加入量为磁珠载量的1~2倍,使磁珠饱和。
3.2 加入1 mL Buffer II到离心管中,盖上离心管盖,充分振荡重悬磁珠。磁性分离,移去上清液。
备注:当步骤3.1取用磁珠体积大于1 mL时,加入与磁珠体积相同的Buffer II。
3.3 重复“步骤3.2” 两次,共洗涤三次。
3.4 加入1 mL用Buffer II稀释的生物素化抗体/蛋白(使磁珠浓度为1 mg/mL),充分振荡重悬磁珠。将离心管置于旋转混合仪上,室温旋转混合60 min。
3.5 磁性分离,将上清液转移至新的离心管。
3.6 按“步骤3.2”的方法洗涤磁珠五次。
3.7 根据后续实验的要求,加入Buffer II或其他合适的缓冲液,重悬磁珠。至此结合生物素化抗体/蛋白步骤完成。磁珠可用于后续操作。
注意事项:
1. 应避免对磁珠进行冷冻等操作。
2. 为减少磁珠损失,每次磁性分离的时间应不少于1 min。
3. 从磁珠保存管中移取磁珠前应充分震荡重悬均匀。操作过程中应避免产生气泡。
4. 建议使用质量好的移液器吸头和反应管,避免因粘附磁珠及溶液而造成损失。
5. 生物素化分子的大小会影响磁珠的载量。用户需要根据实验确定磁珠对特定生物素化分子的载量。
6. 生物素化分子的加入量应为磁珠载量的1~2倍,以使磁珠饱和。
7. 本产品仅供研究使用。
我公司销售的1μm链霉亲和素磁珠北京供应商,质量上佳,价格普惠,欢迎广大新老客户踊跃订购。
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文献和实验技术丨化学发光免疫分析中羧基与Tosyl磁珠包被抗体方法及注意事项
化学发光免疫分析与磁珠 化学发光免疫分析(chemiluminescence immunoassay,CLIA),是具有高灵敏度的化学发光测定技术与高特异性的免疫反应相结合,通过抗原抗体的免疫反应检测各项标志物的免疫分析技术。该技术广泛用于传染病,心脏疾病,肿瘤,妊娠检测等领域。是现阶段体外诊断领域最主流的技术和趋势。磁性微粒(磁珠)是化学发光免疫分析中的一种重要原料。常用磁珠主要是粒径1-3um,修饰了羧基、甲苯磺酰基或者链霉亲和素的免疫磁珠。今天小编就以JSR磁珠为例,为大家介绍一下
传统方法难以对蛋白质进行分离且保持其活性,但采用连在磁珠上的单克隆抗体进行免疫沉淀富集,SDS-PAGE电泳法检测则可达想要结果。用磁珠分离细胞溶菌液中的蛋白质,几乎不需要预先处理,与其他方法相比,非特异性结合也较少。 要从全血,培养上清液,血清,腹水中分离蛋白质,用于制备、分析,运用磁珠作为固相载体进行免疫测定的优点在于快速的结合动力学和简单的分离,洗涤过程。在蛋白质纯化中,为了得到高结合容量需使用大孔如粒径为3.5μm,并用链霉亲和素修饰的磁珠,生物素修饰的免疫球蛋白(IgM)可顺利结合
。通过寡聚核苷酸[Oligo(dT)]序列或链霉亲和素等将DNA和RNA连接磁性微球表面已开发了许多应用。1、DNA/RNA结合蛋白分离在基因表达中,蛋白质也是一个重要角色,然而与DNA/RNA特异性结合得蛋白质通常寿命都很短,且含量少,链霉亲和素修饰的磁珠可用来提取分离DNP/RNP。结合有生物素的DNA或RNA序列与链霉亲和素修饰的磁珠相互作用,蛋白质识别了这些序列,就可在几分钟内结合到固定化DNA/RNA上,这种方法已被用来分离转录因子,限制性内切酶,复制蛋白等。2、mRNA分离在研究基因表达中
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