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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 库存:
60
- 保质期:
一年
- 供应商:
北京百奥莱博科技有限公司
- 保存条件:
2-8℃
- 规格:
50ml|100ml
特别提示:包括细胞裂解液在内,本公司的所有产品仅可用于科研实验,严禁用于临床医疗及其他非科研用途!
产品名称:细胞裂解液
产品货号:HR0271
产品规格:50ml|100ml
储存条件:2-8℃保存。
有效期:一年。
注意事项:
1.实验过程中的所有试剂须预冷;所有器具须放-20℃冰箱预冷。
2.整个过程须保持样品处于低温状态。
使用方法:
根据样本数量,每500μl裂解液中加入2μl蛋白酶抑制剂。
A.细胞裂解
1.取5-10×106个细胞,在4℃,1000rpm条件下离心5-10分钟,小心吸取培养基,尽可能吸干,收集细胞。
2.用冷 PBS 洗涤细胞两次,每次洗涤后尽可能吸干上清。
3.每 5×106个细胞中加入500μl冷的裂解液(每106个细胞加100μl 非变性裂解液。大约相当于6孔板的每孔加入100μl~150μl,或一个75 cm2培养瓶加1~2 ml。裂解液和细胞应充分接触。如果非变性裂解液不足量,细胞裂解效率将会降低),混匀后,在4℃条件下振荡15-20分钟。
4.在 4℃,14000rpm条件下离心15分钟。
5.快速将上清吸入另一预冷的干净离心管,用于下游实验。
B.组织裂解
1.取100mg组织样本剪碎,加入1ml裂解液,用组织匀浆器匀浆至无明显肉眼可见固体。
2.将组织匀浆吸入另一预冷的干净离心管中,在4℃,10000rpm条件下离心5分钟。
3.将上清吸入另一预冷的干净离心管,用于下游实验。
上述蛋白提取物可分装后于-80℃冰箱保存备用。
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