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- 百奥莱博
- MT0029-ZYN
- 北京
- 2025年07月15日
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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 库存：
436
- 英文名：
Bst DNA/RNA Polymerase 3.0
- 保质期：
3年
- 供应商：
北京百奥莱博科技有限公司
- 保存条件：
-20℃
- 规格：
1600U|16000U
特别提示：包括Bst DNA/RNA聚合酶3.0在内，本公司的所有产品仅可用于科研实验，严禁用于临床医疗及其他非科研用途！
产品名称：Bst DNA/RNA聚合酶3.0
英文名称：Bst DNA/RNA Polymerase 3.0
产品货号：MT0029
产品规格：1600U|16000U
本品与Bst DNA 聚合酶（大片段）相比，Bst 3.0 DNA/RNA聚合酶具有更佳的等温扩增活性和更强的逆转录活性。无论以DNA还是RNA为模板，Bst3.0 DNA/RNA 聚合酶都具有5’-3’的DNA聚合酶活性和强烈的链置换活性，但该酶5’-3’和3’-5’的外切酶活性缺失。 在以RNA为模板的LAMP实验中，可实现单酶系统反应。该酶在60-70℃之间具有很好的反转录活性，可有效解决具有二级复杂结构的RNA模板的反转录，而Bst DNA 聚合酶（大片段）无此活性。
产品应用：
1．同时具有较强的延伸能力和逆转录活性；
2．耐热性能极强，对于复杂模板的扩增活性强；
3．强烈的链置换活性，可应用于LAMP检测。
产品特点：
1．恒温PCR扩增；
2．DNA LAMP和RT-LAMP
3．链置换基因合成
4．在60-70度之间具有反转录活性，可用于单管RT-PCR
产品组成：
| 组分 | 1600U | 16000U |
| Bst DNA Polymerase 3.0（8 U/μl) | 200μl | 2ml |
| 10×Bst Buffer | 1ml×2 | 20ml |
| 100 mM MgSO4 | 500μl | 5ml |
保存条件：-20℃保存，有效期3年。
单位定义：一个活力单位即在65℃条件下，30分钟内催化25nmol dNTP的掺入反应成为酸不溶性物质所需的酶量。
反应实例：
A:以pEasy质粒为模板，应用Bst3.0 DNA聚合酶和六对引物进行LAMP实验（70℃，30分钟），1-6分别为：模板0、5ng、2.5ng、1.5ng、1ng、0.5ng，M：DNA Marker2000；B：以140ng human RNA为模板，应用Bst3.0 DNA聚合酶和六对引物进行LAMP实验（70℃，30分钟），1-3：140ng human RNA为模板，4：不加模板，M：M：DNA Marker2000；
以DNA/RNA为模板进行LAMP扩增反应体系配制：
| 加入物 | 加入量 |
| Bst DNA Polymerase 3.0（8 U/μl) | 0.25-1μl |
| 10×Bst Buffer | 2.5μl |
| 100mM MgSO4 | 1.5μl |
| dNTP Mixture(10mM each) | 3.5μl |
| 模板RNA或DNA | 1 ng~1μg |
| *10×LAMP Primer Mix | 2.5μl |
| ddH2O | Up to 25μl |
| 70℃孵育30分钟~1h。 | |
*10×LAMP Primer Mix：各引物组分: FIP/BIP: 16μM each;Loop F/R: 4μM each; F3/B3: 2μM each
注意事项：
1．MgSO4的使用浓度为6~10 mM浓度，1×Bst Buffer中已包含2 mM MgSO4，可自行调整。
2．有文献报道加入Tte Uvrd解旋酶可改善LAMP的效果。
3．使用无模板作为对照检测扩增的特异性。
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文献和实验Bst-catalyzed radiolabeled DNA sequencing
Bst DNA polymerase-catalyzed radiolabeled two-step sequencing reactions are modified from those presented earlier by altering the absolute amounts and the relative deoxy/dideoxynucleotide ratios in the termination mixes
nuclear RNA promoter-based parent vector using a single-stranded inverted repeat DNA and Bst DNA polymerase. The shRNA expression plasmids constructed by this method were confirmed to promote efficient RNA interference knockdown in silkworm cell lines
革新技术！谢晓亮院士 PNAS 重磅推出迄今为止最精准的单细胞 SNV 检测方法
性的难题，这种假阳性主要由两方面原因造成：首先，用于扩增的聚合酶会产生错误。体外 DNA 合成时，对于大多数 DNA 聚合酶来说，碱基替换的错误率为 10-4 到 10−6。这表明人类 60 亿碱基对的基因组在第一个扩增周期就可以产生数千假阳性。第二， 细胞裂解和扩增过程中外力因素造成的 DNA 损伤，以及活细胞内自然发生的损伤，两者均可被 DNA 聚合酶错误识别并造成假阳性。 图片来源：PNAS 为了解决上述难题，北京大学生物医学前沿创新中心主任谢晓亮团队等在 PNAS 在线发表了题为
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