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文献和实验RNA抽提 一, 准备工作 1, 实验器具与材料: (1) 移液枪:1ml、200ul、10ul (2) 吸头:1ml、200ul、20ul (3) 吸头台:放置1ml吸头的一个,放置200ul和20ul的吸头一个 (4) EP管1.5ml、100ul (5) 玻璃研磨器 (6) 容量瓶:1000ml (7) 盐水瓶:100ml (8) 15ml塑料管一个(配75%乙醇用) 2, 实验器具的处理与准备 (1) 塑料制品:(包括吸头、EP
干净玻管(18cm×1.5mm)用Parafilm封口膜封好底部,在16cm处作好标记,垂直放在泡沫板上。电聚焦的管子,买原装的也可以,实在不行自己也可以做的,1ml 的移液管,内径1.5mm左右的,长度取18cm,用玻璃刀做,呵呵,很容易的;玻璃管的处理,先用2M 的NaOH 泡 至少 1hr,用自来水冲后;用双蒸水冲,用双蒸水泡至少1hr,中间至少换2,3 次水;后用2M的HCL 泡至少1 个小时,用双蒸水冲,(不能用自来水冲),然后双蒸水泡至少1 个小时,中间换3,4 次水,可多泡一会。最后
8.3) 2.5mmol/L MgCl2,0.1mg/ml明胶,0.45%NP40,0.45%吐温20高压灭菌,冷冻储存。临用前加0.6μl的10mg/ml蛋白酶K(水溶液)至100μl溶液中。(3)溶血缓冲液0.32mol/L蔗糖,10mmol/L Tris-HCl pH7.5 ,5mmol/L MgCl2,1% Triton X-1002、提取方法(1)用聚蔗糖-泛影葡胺梯度法从血液或培养细胞分离的单核细胞(当PBC〈10%细胞数时用此程序)①将细胞样品用PBS稀释至10ml,置15ml锥形离心管中;②100×g
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