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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 库存:
320
- 英文名:
One-step Bacterial Plasmid Rapid Preps Kit
- 保质期:
长期
- 供应商:
北京百奥莱博科技有限公司
- 保存条件:
常温(18-25℃)
- 规格:
50次
特别提示:包括一步法质粒DNA抽提试剂盒在内,本公司的所有产品仅可用于科研实验,严禁用于临床医疗及其他非科研用途!
产品名称:一步法质粒DNA抽提试剂盒
英文名称:One-step Bacterial Plasmid Rapid Preps Kit
产品货号:GS0053
产品规格:50次
储存条件:常温(18-25℃)
概述
本试剂盒对传统的碱式裂解法提取质粒DNA进行了改良,将碱式裂解法中的菌体重悬、裂解和中和三个步骤合并为一步,随后将质粒DNA结合至吸附柱中,通过洗涤步骤去除其他杂质,最后洗脱得到高纯度的质粒DNA。本试剂盒一次可以处理0.1~1.5ml菌液,获得5μg质粒DNA。所得到的质粒OD260/OD280比值一般在1.8~1.9之间,可直接用于测序、酶切、转化等后续实验。
特点
- 细菌裂解速度超快。
- 裂解液比传统强碱裂解液温和,避免质粒DNA损伤。
- 操作过程快速、方便,全过程可在10min内完成。
应用
质粒抽提
使用说明
请按说明书的标准程序进行实验操作。
组份
纯化套件(吸附柱+收集管);Lysis Buffer UF;Prewash Solution;Wash Solution(Concentrate);Elution Buffer;说明书。
我公司销售的一步法质粒DNA抽提试剂盒北京品牌,质量上佳,价格普惠,欢迎广大新老客户踊跃订购。
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文献和实验actin,山东大学提供样品基因。cDNA制备:测定小鼠肝脏总RNA浓度后,使用BioTeke Super RT Kit 制备20μl cDNA.操作步骤参照试剂盒说明书。一步法荧光定量PCR:Bioteke One-step SYBR real-time RT-PCR Kit20μl反应体系包括:10μl 2×One-step SYBR premixture,7.2μl RNA Free Water,0.4μl Primer F,0.4μl Primer R,1μl cDNA,1μl One-step
检测 采用四种不同的方法抽提质粒pB I121 (其片段大小为1. 5k2b) ,分别用sma I 37℃酶切2h,琼脂糖凝胶电泳,通过电泳图可以看到:方法3得到质粒DNA的量明显偏少,表明裂解细菌主要试剂是NaOH,而不是SDS,若只用SDS也能抽提得到少量质粒DNA,见图1。 图1 四种方法得到的质粒DNA经sm a I单酶切后电泳图(1, 2, 3, 4: 分别用方法1, 2, 3, 4 所提取的质粒pB I121;M:DL15000Ma rke r) 2. 3 PCR扩增h IL
【交流】阳性克隆筛选方法汇总——基于ZFN、TALEN、CRISPR/Cas9基因敲除方法
或者Genloci的微量样品的抽提试剂盒。QIAGEN是老品牌,Genloci这家公司是主要做基因重组的,所以,他们开发的一些产品针对性比较强,而且价格便宜,建议优先使用。 3、 设计合理的引物和选用高保真的Taq酶 引物设计推荐选择靠近靶位点上游100bp和下游200bp处,或者上游200bp和下游100bp处,这样的好处是后面进行酶切分析的时候,对于阳性的克隆,可以很容易观察到2条分开的条带。 Taq酶,建议是用NEB的Fusion或者Q5,毕竟敲除本身很大可能也就是2-3个碱基的缺失,所以,高
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