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- 百奥莱博
- BTN12-59y-GYJ
- 北京
- 2025年07月12日
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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 细胞类型：
大肠杆菌
- 供应商：
北京百奥莱博科技有限公司
- 库存：
478
- 英文名：
E.coli XL10-Gold Strain
- 运输方式：
干冰运输
- 规格：
0.5 mL
特别提示：包括大肠杆菌XL-10 gold 菌种在内，本公司的所有产品仅可用于科研实验，严禁用于临床医疗及其他非科研用途！
产品名称：大肠杆菌XL-10 gold 菌种
英文名称：E.coli XL10-Gold Strain
产品货号：BTN12-59y
产品规格：0.5 mL
大肠杆菌XL10-Gold菌种是在XL1-Blue基础上升级的一种用于克隆和质粒制备的K-12系菌种。
产品特点：
1．Hte突变使得转化效率提高，生长速度更快。
2．核酸内切酶缺陷，能够有效提升制备的质粒DNA的质量。
3．三条重组途径均失去活性，能够有效提高DNA插入片段的稳定性。尤其适用于扩增在BB4菌株中不稳定的?ZAPII重组子。
4．EcoK甲基化修饰和限制系统缺失，故可用EcoK位点甲基化和非甲基化的DNA进行转化并制备非甲基化的DNA。
5．McrA、McrBC和Mrr三套依赖于甲基化的限制系统缺失，可用甲基化的DNA进行转化制备非甲基化的DNA。
6．如果质粒携带?-半乳糖苷酶?片段，则可用蓝白筛选法筛选重组子。
7．可以制备单链DNA（需要特殊的噬菌体），允许超感染。
8．携带琥珀抑制突变，允许某些携带琥珀突变的质粒或噬菌体生长。但不支持携带sam100突变的载体（如?ZAP）生长。
9．具有四环素抗性、氯霉素和萘啶酮酸抗性。
大肠杆菌XL10-Gold菌种的基因型：
K-12,F"[proAB+lacIqZΔM15Tn10(Tetr)Amy Camr],endA1,gyrA96,Hte,lac,Δ(mcrA)183,Δ(mcrCB-hsdSMR-mrr)173,recA1,relA1,supE44,thi-1.
大肠杆菌XL10-Gold菌种基因型符号及其含义列表如下：
| 基因型 | 表现型 |
| K-12 | K-12系的所有菌种默认都携带F因子和λ、e14、rac三种原噬菌体。其中的e14携带野生型mcrA基因，其产物可对甲基化的CG切割。 |
| F"[proAB+lacIqZΔM15Tn10(Tetr)Amy Camr] | 本菌种的F因子还携带proAB lacIqZΔM15 Tn10(Tetr)Amy Camr。其中野生型的proAB可合成脯氨酸；lacIq使lacI抑制蛋白过表达，对lac启动子的抑制加强，降低背景表达；lacZ△M15编码β-半乳糖苷酶基因ω片段，与携带α片段的质粒互补可恢复酶活性，用于蓝白斑筛选；Tn10转座子带四环素抗性；Amy编码淀粉酶，Camr为氯霉素抗性 |
| endA1 | 核酸内切酶I缺失 |
| gyrA96 | DNA促旋酶基因的第87个密码子从编码天门冬氨酸的GAC变成编码天门冬酰胺的AAC，导致对萘啶酮酸和荧光kuí啉的抗性 |
| Hte | 使宿主中更易被大质粒转化 |
| lac | 不能利用乳糖 |
| Δ(mcrA)183 | 在此菌种中，e14原噬菌体携带的mcrA基因缺失，故不能对甲基化的CG切割 |
| Δ(mcrCB-hsdSMR-mrr)173 | 缺失对甲基化C的限制、缺失EcoK修饰限制系统，缺失对甲基化A的限制 |
| recA1 | ATP依赖型重组酶失活，recBCD、recE和recF三条重组路径均复丧失，重组率降低1万倍。适合扩增有回文结构的高拷贝质粒 |
| relA1 | 允许在无蛋白质合成时有RNA合成 |
| supE44 | 抑制琥珀突变，为某些噬菌体必需 |
| thi-1 | 需要硫氨才能生长 |
保存条件：-80℃，有效期一年
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文献和实验保持相对较高拷贝数的同时使本底表达对于细胞的毒性降至最低的效果。MR 系列 ® －克隆甲基化 DNA 真核基因组DNA常常因高度甲基化而被大肠杆菌修饰系统切割、删除，在构建文库时，由于要对cDNA进行甲基化保护，某些cDNA克隆也较难完成。采用Stratagene的MR (Minus Restriction)突变删除了修饰系统的感受态细胞，可以构建质量非常高的cDNA和基因组文库。这些细胞包括：用于大质粒克隆的XL10-Gold®超级感受态细胞，克隆连接DNA、转化效率 目前最高
large fragment cloning-Molecular Biology
, and none of them all of it. Can pBlueScript realistically take inserts of 12.5kb or would I be better off trying a different vector e.g. a phagemid or cosmid? Does anybody have any tips for dealing with large inserts generally? I use XL-10 gold or XL-1 blue cells for the transformation
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