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- 2025年11月01日
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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 规格：
5米/卷
技术参数：
△PH稳定范围 : 5-9
△污染物水平: 硫化物<0.3%; 重金属<50ppm
△化学兼容性: 与很多盐兼容，比如CaCl2, （NH4）2SO4；还可与分子生物学及酶学中常用的水溶剂、有机溶剂兼容，比如异丙醇、乙醇和bingtong。
△温度抵抗性：可煮沸，可高压灭菌。
△蛋白吸附： 每克透析袋吸附蛋白量小于1ng
储存条件:
透析袋可存放于10-29度；每次使用后将余下的膜放回袋子并密封好，以防干裂。
透析袋使用前处理方法:
1. 把透析袋剪成适当长度（10-20cm）的小段。
2. 在大体积的2%（W/V）碳酸氢钠和 1mmol/L EDTA（pH 8.0）中将透析袋煮沸10分钟。
3. 用蒸馏水彻底清洗透析袋。
4. 放在 1mmol/L EDTA（pH 8.0）中将之煮沸10分钟。
5. 冷却后，存放于4度，必须确保透析袋始终浸没在溶液内。从此时起取用透析袋是必须戴手套。
6. 用前在透析袋内装满水然后排出，将之清洗干净。
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文献和实验载体,并注意不同的表达载体上的融合标签和携带的抗性基因,其中有些标签是可以去除的. (3)构建好的载体最好进行测序验证,保证读码框正确,即没有移码. (4)长期保存的pET重组子在高浓度甘油(19%)中会导致质粒不稳定. (5)T7lac启动子是严谨启动子,IPTG诱导时可以优化最佳浓度(25uM-1mM之间)使目的蛋白达到最佳的活性和溶解性. (6)37℃生长常常会使一些蛋白累积形成包涵体,而30℃生长则可能产生可溶的和有活性的蛋白.在某些情况下,低温
载体，并注意不同的表达载体上的融合标签和携带的抗性基因，其中有些标签是可以去除的。 (3)构建好的载体最好进行测序验证，保证读码框正确，即没有移码。 (4)长期保存的pET重组子在高浓度甘油(19%)中会导致质粒不稳定。 (5)T7lac启动子是严谨启动子，IPTG诱导时可以优化最佳浓度(25uM-1mM之间)使目的蛋白达到最佳的活性和溶解性。 (6)37℃生长常常会使一些蛋白累积形成包涵体，而30℃生长则可能产生可溶的和有活性的蛋白。在某些情况下，低温
质粒，再转化BL21。筛选LB平板需含50μg/μl 卡那霉素。 [5]pET重组子鉴定 如果亚克隆成功，阳性菌落数远大于阴性菌落。检验转化子的方法很多，包括PCR、质粒抽提及酶切分析、测序，体外转录和翻译。 [6]DE3溶原菌的诱导表达 （1）、从新鲜的划线平板中挑取单克隆到50ml含50μg/μl 卡那霉素的液体培养基中，37℃培养至OD600为0.4-1。 （2）、培养基中加入100mMIPTG至终浓度为0.4mM（T7启动子）或1 mM（T7lac启动子），继续培养2-3小时
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