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427
- 英文名:
PreScission Protease
- 保质期:
长期
- 供应商:
北京百奥莱博科技有限公司
- 保存条件:
-20℃
- 规格:
50U
特别提示:包括PreScission蛋白酶在内,本公司的所有产品仅可用于科研实验,严禁用于临床医疗及其他非科研用途!
产品名称:PreScission蛋白酶
英文名称:PreScission Protease
产品货号:JN0161
产品规格:50U
本酶是一种由人鼻病毒14型的3C蛋白酶和GST组成的融合蛋白。这种蛋白酶特异识别短肽 Leu-Phe-Gln/ Gly-Pro中的Gln和Gly残基而进行切割,底物的识别和切割不仅依赖于融合蛋白的一级结构还依赖于融合蛋白的二级和三级结构。该酶在目标蛋白与谷胱甘肽-S-转移酶蛋白融合(GST)之间,由于含有蛋白酶特异识别短肽 Leu-Phe-Gln/Gly-Pro,所以切割插入到PGEX-6P-1、PGEX-6P-2、PGEX-6P-3等带有酶底物识别 多肽序列的融合蛋白,把GST和目标蛋白切开。
使用建议:使用前可通过10μg~20μg蛋白样品预酶切以确定最佳反应条件及酶用量,对于不易酶切的蛋白,可通过增加酶量及延长反应时间的方法获得所需的酶切结果。
活性定义:在5℃下,1U酶可以在50mM Tris-HCl, pH 7.0,150mM NaCl,1mM EDTA,1mM DTT缓冲液中16个小时内将100μg GST融合蛋白裂解。
质量保证:经多次柱纯化,SDS-PAGE胶检测仅可见清晰单一的目的条带;本制品不含有非特异性的蛋白酶切活性。
我公司销售的PreScission蛋白酶报价,质量上佳,价格普惠,欢迎广大新老客户踊跃订购。
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文献和实验蛋白的损失。 如何进行柱上酶切 柱上酶切纯化路线比较简单,只需上样后加入蛋白酶,在合适的温度下进行孵育一段时间,经过清洗便可得到纯度较高的无标签的目标蛋白。 去除标签的关键在于选择高效的蛋白酶并构建相应的氨基酸识别序列。下表展示的是几种常见的内切酶及对应酶切位点。 组氨酸标签由于分子量小通常不需要去除。如有必要,可使用 TEV 蛋白酶去除组氨酸标签。由于TEV酶带有六组氨酸标签,因此可实现柱上酶切而得到高纯度无标签的目标蛋白。 PreScission
。这13个载体中有9个的多克隆位点是扩展过的,有6个限制性酶切位点。扩展后的多克隆位点方便我们从λ噬菌体载体构建的文库中将所需的基因克隆出来并定向插入到表达载体中。所有载体上都带有可以将GST切割下来的蛋白酶识别位点,不同载体携带的蛋白酶不同,可以分成T系列、X系列和P系列,分别代表采用凝血酶Thrombin、Xa因子蛋白酶以及GE医疗产的PreScission™蛋白酶作为蛋白酶切割位点。前面两个都是非常经典的融合表达载体的蛋白酶切割位点,但是由于这两种蛋白酶切割需时较长而且要求在室温条件下切割GST
问:我现在正在做神经细胞的培养,听说木瓜蛋白酶的消化作用比较好,购买后发现,不是简单的用三蒸水配制,有哪位高手能告之一二,万分感谢!答:我也用的sigma的木瓜酶,用hepes缓冲液很好溶的,一直没发现溶解度低的问题。其实关于酶的选择,也不能简单的看消化作用如何,还要考虑到实验设计,比如说胰酶的消化效果总体尚可,特点是消化出的细胞电生理状态稳定,膜状态较好,但是胰酶对某些蛋白损伤很大,比如NMDA受体,如果楼主的实验设计是培养细胞后进行NMDA受体电流的记录,那么选胰酶就不是上策;而且从产量
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