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- 百奥莱博
- RFT196-MKS
- 北京
- 2025年07月15日
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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 库存：
123
- 英文名：
Protease inhibitor cocktail for bacterial cell extracts
- 保质期：
12个月
- 供应商：
北京百奥莱博科技有限公司
- 保存条件：
-20℃
- 规格：
1ml|5×1ml
特别提示：包括蛋白酶抑制剂混合物(细菌蛋白提取用)在内，本公司的所有产品仅可用于科研实验，严禁用于临床医疗及其他非科研用途！
产品名称：蛋白酶抑制剂混合物(细菌蛋白提取用)
英文名称：Protease inhibitor cocktail for bacterial cell extracts
产品货号：RFT196
产品规格：1ml|5×1ml
本品是一种用于细菌蛋白提取的蛋白酶抑制剂混合物(20mM AEBSF,2mM Bestatin,0.3mM E64 和 2mM Pepstatin A in DMSO)，并提供独立包装的0.1MEDTA。一个包装的本产品通常足够用于100ml裂解液的配制。
细菌提取物中含有许多内源性的蛋白酶、磷酸酶等，容易导致提取物中的蛋白降解或去修饰，从而影响后续的蛋白检测。因此在提取物中添加适当的蛋白酶、磷酸酶等抑制剂是防止蛋白降解和去修饰的有效方法。
本产品为经优化和测试的用于细菌蛋白提取的蛋白酶抑制剂混合物，包含了广谱的丝氨酸、半胱氨酸和酸性蛋白酶抑制剂、以及氨基肽酶抑制剂。
本产品使用便捷，通常以1:100的比例分别把蛋白酶抑制剂混合物和0.1MEDTA加入裂解液中，即可用于细菌蛋白的提取，并有效抑制蛋白降解。如用于检测金属蛋白酶活性，则不宜添加EDTA。
本产品可以有效抑制细菌提取物中的各种蛋白酶活性，如丝氨酸蛋白酶、氨基肽酶、半胱氨酸蛋白酶、苏氨酸和天冬氨酸蛋白酶、金属蛋白酶等。其中AEBSF是一种水溶性的丝氨酸蛋白酶不可逆抑制剂，其抑制常数与PMSF和DFP的抑制常数相似，可以有效抑制胰蛋白酶(trypsin)、糜蛋白酶(chymotrypsin)、纤溶酶(plasmin)、激肽释放酶(kallikrein)和凝血酶(thrombin)等蛋白酶，作为PMSF和DFP的替代物，AEBSF的毒性更低、水溶性和水溶液稳定性更好。Bestatin是氨基肽酶可逆抑制剂；E64是半胱氨酸蛋白酶不可逆抑制剂；Pepstatin A是天冬氨酸蛋白酶可逆抑制剂；EDTA作为螯合剂是金属蛋白酶的可逆抑制剂。
使用方法：
1. 本蛋白酶抑制剂混合物为100×的储存液，使用时按照1:100的比例加入到裂解液中(例如，1ml裂解液中加入10μl蛋白酶抑制剂混合物)，混匀后即可使用。含有蛋白酶抑制剂混合物的裂解液宜现用现配，不宜配制后冻存待后续使用。根据需要，0.1M的EDTA也按照1:100的比例加入到裂解液中(如用于检测金属蛋白酶活性，则不宜添加EDTA)。
2. 待所需的抑制剂添加完毕混匀后，就可以开始进行常规细胞或组织的裂解和蛋白提取。
储存条件：-20℃，有效期12个月。
我公司销售的蛋白酶抑制剂混合物(细菌蛋白提取用)北京供应商，质量上佳，价格普惠，欢迎广大新老客户踊跃订购。
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文献和实验它的蛋白溶液可以冻存)与Zwittergent 等双性离子去垢剂； ③还原剂：DTT、DTE、TBP、Tris-base 等；④蛋白酶抑制剂及核酸酶：EDTA、PMSF、蛋白酶抑制剂混合物(Protease inhibitor cocktails)等，如为了去除缓冲液中存在的痕量重金属离子，可在其中加入0.1～5mmol/LEDTA，同时使金属蛋白酶失活。 三、 仪器和试剂 仪器 离心机、移液器、研钵、离心管、冰箱。 试剂 1. 20mL 样品提取缓冲液：2.5mL
核蛋白提取 实验准备： 1 4℃离心机 2 根据标本数计算所需I，II，III，IV总体积，取出液体，并加入蛋白酶抑制剂，（III由加蛋白酶抑制剂I与加蛋白酶抑制剂II混合物） 实验操作： 1 收集细胞。10ml 对照细胞（1-2*105/ml ）培养48h后，15ml 离心管收集，300g（1370 rpm）* 5min。弃上清，加1ml 1*PBS轻轻涡旋混匀后转移至1.5ml EP管。 2 4℃，300g * 5min，弃上清。 3 重悬
/L CaCl2、0.24 mol/L 蔗糖、0.5 mmol/L 亚精胺（Sigma)、0.15 mmol/L 精胺（Sigma)、0.02% 叠氮钠，并加入蛋白酶抑制剂混合物，见 7.2.1。 ( 3 ) 这种缓冲液能够被贮存在 4°C 条件下数月，需要防止真菌污染。蛋白酶抑制剂在使用之前方可加入，不要在准备溶剂的时候加入。 2.3 细胞核蛋白质的分离和提取 所有溶液都使用蛋白酶抑制剂。 ( 1 ) 含有膜和残留细胞骨架（图 8-1，泳道 M)：第一份馏分用 NSB
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