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(1)HMRn(High Mass Range MSn,高质量范围MSn):MSn多级质谱的分子量范围可达到8,000 Da,包括扩展Orbitrap的m/z 至8,000和LTQ分离母离子m/z至8,000,并具有MSn(n=1~10)能力。比如使用HMRn做NativeOmics,可以用多级质谱鉴定膜蛋白的配体,更好理解蛋白的相互作用。
(2)PTCR(Proton Transfer Charge Reduction ,质子转移电荷减少)离子源:全氟菲烷(PFPP) 离子,用于随后双级线性离子阱中的气相离子反应,利用质子转移减少母离子或子离子的多电荷态,使多电荷谱图的质量提高、Top-down组学的解析更容易,可以更好地揭示蛋白隐藏的特征。
(3)RTS(Real-time search实时搜索)算法软件:提供了强大的数据库功能,当已鉴定的蛋白和初始数据库匹配一致就标记为不再进行MS3,因此可有效缩短时间,提升1倍通量。在选择已确定的母离子进行 SPS MS3 定量时,可提高定量准确性和TMT实验的蛋白质组覆盖率。
(4)双曲面QR5 分段四极杆:增长为25 cm,并扩大直径,提升离子传输效率,并可有限选择分离0.4 Da的母离子。
(5)具有50万分辨率,扩展选项后可达到100万分辨率。
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文献和实验基于质谱的蛋白质鉴定,第6节:MALDI-TOF-MS蛋白和肽样品的制备
消化后,MALDI技术分析得到的肽指纹图谱。使用1-D SDS PAGE胶分离后的目标蛋白分别使用:无戊二醛的银染法(图左)和Zn2+-imidazol染色法(图右)进行染色。切胶后用胰蛋白酶进行消化,使用多孔 R2磁珠进行浓缩,DE-MALDI-RETOF-MS分析,得到胰蛋白酶肌动蛋白肽的质量及其S/N(斜体)比率。 本文由百泰派克生物科技整理编辑。未经许可,不得转载。 北京百泰派克公司采用高分辨率质谱平台技术,包括Thermo Fisher的Q Exactive质谱仪,LTQ Orbitrap
中国医学科学院药物研究所再帕尔•阿不力孜团队:一种高灵敏、高覆盖质谱成像技术新进展
了生物样本中超过 1500 种代谢物的空间分布图谱,将功能代谢物的时空变化与组织结构和生物功能联系起来,有助于分子组织学和分子病理学研究。 研究结果: 1.AFADESI-MSI 喷雾溶剂系统的优化 自制的 AFADESI 离子源与高分辨率 Q-Orbitrap 质谱仪结合使用。设计了可重复的组织匀浆模型,以优化喷雾溶剂系统。图1中显示了不同喷雾溶剂系统中代表性内源性代谢物的MSI。结果显示 ACN/H2O(8:2)为检测的最佳溶剂,且高速气流可显著提高代谢物的离子强度。研究通过优化
LC-MS和MALDI-TOF分析,主要得分子量信息。对于蛋白质样品,还可以测定氨基酸序列。质谱仪的分辨率是一项重要技术指标,高分辨质谱仪可以提供化合物组成式,这对于结构测定是非常重要的。双聚焦质谱仪,傅立叶变换质谱仪,带反射器的飞行时间质谱仪等都具有高分辨功能。 质谱分析法中的样品选择 质谱分析法对样品有一定的要求。进行GC-MS分析的样品应是有机溶液,水溶液中的有机物一般不能测定,须进行萃取分离变为有机溶液,或采用顶空进样技术。有些化合物极性太强,在加热过程中
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