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- 百奥莱博
- HR0348-GLD
- 北京
- 2025年07月06日
企业认证
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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 库存：
184
- 保质期：
一年
- 供应商：
北京百奥莱博科技有限公司
- 保存条件：
2-8℃
- 规格：
100ml
特别提示：包括洗涤液(Western)在内，本公司的所有产品仅可用于科研实验，严禁用于临床医疗及其他非科研用途！
产品名称：洗涤液(Western)
产品货号：HR0348
产品规格：100ml
Western 洗涤液用于Western时一抗二抗的孵育后的洗涤。可以有效的降低背景，增强信噪比。
储存条件：2-8℃保存。
有效期：一年。
注意事项：
●本洗涤液经过过滤除菌处理，使用过程中尽量避免污染。
● 开启后2周内使用完。
使用方法：
在一抗或二抗孵育结束后，加入适量Western洗涤液，使之能盖住蛋白膜，在摇床上洗涤5分钟后，吸尽洗涤液，再加入新的洗涤液洗涤。共洗涤3次，每次5分钟。然后进行后续的操作。
我公司销售的洗涤液(Western)现货供应，质量上佳，价格普惠，欢迎广大新老客户踊跃订购。
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文献和实验做了很久的 WB（western blot），走了很多弯路，其实发现 WB 想要做好并不难，总结了 WB 实验中可能会遇到的问题，分析了可能的原因及对应的解决方案，希望能成为你实验成功的基石。 问题 1：转膜不充分 (1) 膜没有完全均匀湿透 使用 100% methanol 浸透膜。 (2) 靶蛋白分子量小于 10 000 选择小孔径的膜，缩短转移
。也可以用考马斯亮蓝快速染色液对完成转膜的SDS-PAGE胶进行染色，以观察蛋白的残留情况。 4. 封闭(Blocking)： 转膜完毕后，立即把蛋白膜放置到预先准备好的Western洗涤液中，漂洗1-2分钟，以洗去膜上的转膜液。吸尽洗涤液，加入Western封闭液，在摇床上缓慢摇动,室温封闭60分钟。 从转膜完毕后所有的步骤，一定要注意膜的保湿，避免膜的干燥，否则极易产生较高的背景。 对于一些背景较高的抗体，可以4℃封闭过夜。 5. 一抗
1. 溶液准备： 转印缓冲液：0.025M Tris base ， 0.192 M甘氨酸 ， 30%甲醇 10×TBST：250mM Tris-HCl （ pH 8.0 ） ， 1.25M NaCl ， 0.5%Tween20 封闭液：1×TBST ， 3%脱脂奶粉 洗涤液：1×TBST 2. 实验程序： A. 膜的准备： 将PVDF膜切成条浸在甲醇中，室温条件下在摇床上摇1min，去除甲醇后加入1×TBST备用。 B. 膜转印： 1. 细胞或组织裂解液进行SDS
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