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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 库存:
342
- 英文名:
SDS Lysis Buffer
- 保质期:
一年
- 供应商:
北京百奥莱博科技有限公司
- 保存条件:
-20℃
- 规格:
100ml
特别提示:包括SDS裂解液在内,本公司的所有产品仅可用于科研实验,严禁用于临床医疗及其他非科研用途!
产品名称:SDS裂解液
英文名称:SDS Lysis Buffer
产品货号:YT039
产品规格:100ml
本品是一种比较强烈的细胞组织裂解液。SDS裂解液裂解得到的蛋白样品可以用于常规的Western、ChIP(染色质免疫共沉淀,chromatin immunoprecipitation)等。
SDS裂解液的主要成分为50mM Tris (pH8.1),1% SDS,以及sodium pyrophosphate,β-glycerophosphate,sodium orthovanadate,sodium fluoride,EDTA,leupeptin等多种抑制剂。可以有效抑制蛋白降解。
用SDS裂解液裂解得到的蛋白样品,可以用百奥莱博的BCA蛋白浓度测定试剂盒(YT036/YT037)测定蛋白浓度。由于含有较高浓度的去垢剂,不能用Bradford法测定由本裂解液裂解得到样品的蛋白浓度。
储存条件:-20℃,有效期一年。
我公司销售的SDS裂解液北京供应商,质量上佳,价格普惠,欢迎广大新老客户踊跃订购。
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文献和实验。 3. 推荐优选柱式法进行蛋白样品提取 解决蛋白样品粘稠的最佳方式是改变蛋白质的制备方式,可以选择新一代柱式蛋白提取法替代传统的裂解液法。柱式法通过使用优化的裂解液配方,可有效提高裂解液对样品的裂解效率,特别是可以提升难溶蛋白的溶解效率。同时配合使用离心管柱技术有效阻截核酸,让蛋白溶液瞬间澄清无粘稠物产生,无需复杂操作,即可获得高质量无丢失的蛋白样品。 测试实例:裂解液法 VS 柱式法 同种样品分别使用裂解液法和柱式法进行 WB 样品制备,SDS-PAGE 电泳后考染如图
原理 免疫共沉淀(Co-Immunoprecipitation)是利用抗原和抗体的特异性结合以及 Protein A 或 G 特异性地结合到抗体的Fc 片段的现象探测两个蛋白分子间是否存在相互作用的一种方法。在细胞裂解液中加入针对蛋白M的抗体,孵育后再加入Protein A 或 G 预处理的 Sepharose 珠,若细胞中有与蛋白M结合的蛋白 N,就可以形成这样一种复合物:“蛋白 N-蛋白M—抗蛋白 M 抗体—Protein A 或 G—Sepharose 珠”,经 SDS
降解测序。 五、注意事项 细胞裂解采用温和的裂解条件,不能破坏细胞内存在的所有蛋白质-蛋白质相互作用,多采用非离子变性剂(NP40 或 Triton X-100)。每种细胞的裂解条件是不一样的,通过经验确定。不能用高浓度的变性剂(0.2% SDS),细胞裂解液中要加各种酶抑制剂,如商品化的 cocktailer。 使用明确的抗体,可以将几种抗体共同使用。 使用对照抗体: ① 单克隆抗体:正常小鼠的 IgG 或另一类单抗 ② 兔多克隆抗体:正常兔
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