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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 库存:
383
- 保质期:
二年
- 供应商:
北京百奥莱博科技有限公司
- 保存条件:
DAB不使用时密封置4℃
- 规格:
1g
特别提示:包括DAB在内,本公司的所有产品仅可用于科研实验,严禁用于临床医疗及其他非科研用途!
产品名称:DAB
产品货号:ZN1966
产品规格:1g
保存:DAB不使用时密封置 4℃保存。
有效期:二年。
背景介绍:
3,3’-Diaminobenzidine tetrahydrochloride(DAB),FW360.1,是过氧化物酶最重要的显色剂之一。在 H2O2 存在的条件下,显色呈鲜艳的棕黄色,可用于免疫组化及各种印迹检查法。
使用方法:
1.在过氧化物酶的检测完成以后,0.01 M PBS或TBS 充分洗涤,一般 5分钟×4次。
2.准备 100ml 0.01M PBS或TBS 缓冲液(pH7.2-7.6)。秤取 25-50mg DAB 干粉,加入缓冲液中并溶解。使用前吸取 30%H2O2 100μl,加入缓冲液中,混匀。将标本浸入显色液中,一般显色 10-30分钟。若无背景出现则可继续显色。
3.蒸馏水充分洗涤以终止反应。必要时苏木素复染1分钟左右。水洗。
4.脱水,透明,中性树胶封片,显微镜观察。
我公司销售的DAB现货供应,质量上佳,价格普惠,欢迎广大新老客户踊跃订购。
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文献和实验化物酶,然后用PBS洗涤三次,每次 5min。4 ) 加入一抗(用3%BSA-PBS封闭液1:50稀释一抗),37℃湿盒孵育1h。5 ) 加入Post-blocking室温湿盒孵育30min,然后用PBS洗涤三次,每次5min。6 ) 加入稀释好的辣根过氧化物酶(HRP)标二抗,室温下湿盒孵育30min。7 ) 用PBS洗涤玻片5次,每次5min。8 ) 按照DAB试剂盒说明添加显色液,避光显色30s-5min。用蒸馏水终止显色反应。9 ) 苏木精进行复染色3min,用蒸馏水冲洗。10
(1)DAB显色时间不是固定的,主要由显微镜下控制显色时间,到出现浅棕色本底时即可冲洗; (2)DAB显色时间很短(如几秒或几十秒)就出现很深的棕褐色,这很可能说明你的抗体浓度过高或抗体孵育时间过长,需要下调抗体浓度或缩短你的抗 体孵育时间; (3)此外,若很短时间就出现背景很深,还有可能你前面的封闭非特异性蛋白不全,需要延长封闭时间; (4)DAB显色时间很长(如超过十几分钟)才出现
过氧化物酶 DAB 法 过氧化物酶(peroxidase)与细胞 色素氧化酶具有相似的化学本质,是一类氧化还原酶,可使过氧化氢(H2 O2 )分解生成水和释放氧。过氧化物酶广泛分布于乳腺、甲状腺、唾液腺、肠上皮、血细胞和肥大细胞等。存在于细胞过氧化物酶体中,是机体的抗氧化酶,在防止氧代谢物损伤中具有重要作用。显示过氧化物酶常用联苯胺法。联苯胺如DAB和四甲基联苯胺(3,3,5,5,―tetramethyl benzidine,TMB)能被过氧化物酶分解过氧化氢产生的氧所氧
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