WB封闭液(BSA)北京供应商

WB 为何又翻车？

① 膜封闭时间不够，室温下通常摇床孵育膜 1h，出现这种情况可以更换合适的封闭液或者适当延长封闭的时间； ② 抗原抗体免疫过程中一抗稀释度太高，可以多设置几组一抗浓度，摸索最适宜的抗体稀释度； ③ 在整个实验过程中膜发生干燥或手套反复接触过也会发生背景值高的情况，因此实验过程中要注意保持膜的湿润，使用镊子夹取膜。 3、WB 结果中有杂带干扰 ① 抗体纯度不高会产生非特异性条带影响结果，高纯度抗体条带特异性更好，建议更换抗体； ② 一抗浓度过高，降低一抗稀释比，目的条带和杂带可能会减弱

关于BSA封闭液的使用方法大讨论

它们都是BSA A、请问各位高手,在进行免疫荧光的实验时,浸一抗之前,要用的封闭液中1%的BSA是怎么配制? 封闭液封闭后还用PBS 清洗干净再浸一抗吗? 1.可以直接用0.02M的PBS 配制 2.不用PBS 清洗干净，直接浸一抗。 B、各位高手，间接法中我想摸索封闭液BSA的最佳浓度，用抗原 包被后，用不同浓度的BSA(0.5%，1%，2%，3%)封闭，其他条件固定，测得 OD450nm后，可以看出随着BSA浓度

Akt的WB问题

yukituki 最近做Akt的WB遇到了问题： 我用的是CST的Akt抗体以及pAkt抗体，染小鼠组织（肝，肾，脾，肺，脑等）。 5%BSA（TBST稀释）4度封闭过夜 之后一抗是5%脱脂牛奶稀释，1：500，过夜，二抗1：2000稀释，2-3h 染出来的片子很脏，而且Akt勉强可以见到，但是pAkt没染出来条带 提组织用的是RIPA（每100mg用500ul），加了PMSF以及NaF，冰上