再生纤维素透析袋（8000-10000）/再生纤维素透析袋（

含组氨酸标签的蛋白诱导表达及纯化操作指南！

一、用 IPTG 诱导启动子在大肠杆菌中表达克隆化基因所需特殊试剂：1M IPTG1. 将目的基因与 IPTG 诱导表达载体连接，构成重组质粒并转化相应的表达用的大肠杆菌。将转化体铺于含相应抗生素的 LB 平板，37℃ 培养过夜。通过酶切序列分析等筛选带有插入片段的转化体。2. 分别挑取对照菌和重组菌 1 个菌落，接种于 1 ml 含有相应抗生素的 LB 培养液中，37℃ 通气培养过夜。3. 取 100 微升过夜培养物接种于 5 ml 含有相应抗生素的 LB 培养液中（各 10 份），适当

免疫血清的鉴定、纯化和保存

分钟，将上清液（含白蛋白）弃去，取沉淀物（含球蛋白）溶于少量生理盐水中。 （4）用33%饱和硫酸铵提取γ球蛋白，方法是将上述提取物生理盐水溶液两份加一份饱和硫酸铵。然后再离心10000rpm，其余操作同上。 （5）按同样方法用33%饱和硫酸铵再提取一次。 （6）将提取物装入透析袋，在生理盐水中透析，以除去其中所含的硫酸铵。 经盐析法提取的蛋白质为粗提的免疫球蛋白，若要获得纯化的免疫球蛋白，必须经凝胶过滤或离子交换层析提纯

【资源】蛋白纯化经验指南（）

下来，那就不能用了。凝胶类的填料很容易长菌，用完得洗干净，保存在20%的乙醇中。 26) 我想在想纯化peg修饰的蛋白，可是我目前只有弱阳离子交换的羧甲基纤维素，你看能不能纯化阿，好像文献上都用sp-sepharose，纤维素是不是不行啊？另外，目前没有专门的层析装置和蠕动泵，我用普通的层析柱是不是就可以阿，流量是不是也不用太精确阿？谢谢！ 离子交换的方法是可以的，但是我觉得疏水也很值得一做，因为修饰后电荷变化了，其实疏水性也增加了，所以这些方法都可以，此外只要你的CM纤维素能挂住