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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 供应商：
上海烜雅生物科技有限公司
- 库存：
36
- 英文名：
Human Ureteral: Normal Ureteral Epithelial Cells
- 运输方式：
常温运输/干冰运输
人输尿管上皮细胞简介：
人输尿管上皮细胞分离自正常人输尿管组织内皮，人输尿管上皮细胞主要功能：（1）输尿管连接肾与膀胱。（2）上皮细胞形成完整包膜屏障，输送尿液至膀胱储存，防止尿液渗入。烜雅生物科技提供的人输尿管上皮细胞均来自新鲜组织，用于培养人输尿管上皮细胞的组织采集于地方医院，组织的采集根据美国IRB 和 HIPAA批准的方案进行。细胞的培养采用公司专利产品人输尿管上皮细胞培养试剂盒(Human Ureteral PrimaCell™: Normal Ureteral Epithelial Cells Cat No. 3-0337)来优化目的细胞生长条件，以降低杂细胞（如脂肪细胞、纤维细胞等）的污染，同时保证质量的稳定。在烜雅生物技术部标准的操作流程下，人输尿管上皮细胞传5代以上仍可以保持原代细胞的分化状态，进而可以用于评估体外药物模型系统和调节特定基因的遗传功能。
人输尿管上皮细胞使用方法：
1、您收到细胞后，请按照以下方法进行操作：
取出15ml离心管，75%酒精擦拭培养瓶，拆下封口膜，放入37℃，5%CO2细胞培养箱中静置2-3小时以稳定细胞状态，然后离心换用新鲜完全培养液继续培养或进行传代。
2、细胞传代：
待细胞达到一定密度（不超过1x10^6/ml）可按照以下方法换液培养或传代。
方法①：收集细胞，1000rpm离心5min，弃去上清液，补加1-2mL培养液后吹匀，将细胞悬液按1：2到1：3的比例分到新的含8ml培养基的新皿中或者瓶中。
方法②：可选择半数换液方式，弃去半数培养基后，将剩余细胞悬起，将细胞悬液按1：2到1：3的比例分到新的含8ml培养基的新皿中或者瓶中。
3、细胞冻存：
1）将细胞悬液转移至15ml离心管中，1000rpm离心5min；
2）用适量的冻存液（FBS：DMSO=9 ：1）重悬细胞，并放置于冻存管中；
3）先将细胞冻存管放置于-20℃ 1.5h，然后将其移入-80℃过夜，24h后转入液氮中进行长期保存。使用程序降温盒可直接放入-80℃。
4、细胞复苏：
1）从液氮中取出细胞冻存管（注意：佩戴防爆管面具），快速将其置入37℃水浴中解冻，直至冻存管中无结晶，然后用75%的酒精擦拭冻存管外壁；
2）将冻存管中的细胞移至含10ml完全培养基的15ml离心管中， 1000rpm离心5min；
3）弃上清，沉淀用5ml完全培养基重悬，接种25cm2培养瓶，于37℃，5%CO2细胞培养箱中培养；
4）第二天，换用新鲜完全培养基继续培养。
人输尿管上皮细胞分离自正常人输尿管组织内皮，人输尿管上皮细胞主要功能：（1）输尿管连接肾与膀胱。（2）上皮细胞形成完整包膜屏障，输送尿液至膀胱储存，防止尿液渗入。烜雅生物科技提供的人输尿管上皮细胞均来自新鲜组织，用于培养人输尿管上皮细胞的组织采集于地方医院，组织的采集根据美国IRB 和 HIPAA批准的方案进行。细胞的培养采用公司专利产品人输尿管上皮细胞培养试剂盒(Human Ureteral PrimaCell™: Normal Ureteral Epithelial Cells Cat No. 3-0337)来优化目的细胞生长条件，以降低杂细胞（如脂肪细胞、纤维细胞等）的污染，同时保证质量的稳定。在烜雅生物技术部标准的操作流程下，人输尿管上皮细胞传5代以上仍可以保持原代细胞的分化状态，进而可以用于评估体外药物模型系统和调节特定基因的遗传功能。
人输尿管上皮细胞使用方法：
1、您收到细胞后，请按照以下方法进行操作：
取出15ml离心管，75%酒精擦拭培养瓶，拆下封口膜，放入37℃，5%CO2细胞培养箱中静置2-3小时以稳定细胞状态，然后离心换用新鲜完全培养液继续培养或进行传代。
2、细胞传代：
待细胞达到一定密度（不超过1x10^6/ml）可按照以下方法换液培养或传代。
方法①：收集细胞，1000rpm离心5min，弃去上清液，补加1-2mL培养液后吹匀，将细胞悬液按1：2到1：3的比例分到新的含8ml培养基的新皿中或者瓶中。
方法②：可选择半数换液方式，弃去半数培养基后，将剩余细胞悬起，将细胞悬液按1：2到1：3的比例分到新的含8ml培养基的新皿中或者瓶中。
3、细胞冻存：
1）将细胞悬液转移至15ml离心管中，1000rpm离心5min；
2）用适量的冻存液（FBS：DMSO=9 ：1）重悬细胞，并放置于冻存管中；
3）先将细胞冻存管放置于-20℃ 1.5h，然后将其移入-80℃过夜，24h后转入液氮中进行长期保存。使用程序降温盒可直接放入-80℃。
4、细胞复苏：
1）从液氮中取出细胞冻存管（注意：佩戴防爆管面具），快速将其置入37℃水浴中解冻，直至冻存管中无结晶，然后用75%的酒精擦拭冻存管外壁；
2）将冻存管中的细胞移至含10ml完全培养基的15ml离心管中， 1000rpm离心5min；
3）弃上清，沉淀用5ml完全培养基重悬，接种25cm2培养瓶，于37℃，5%CO2细胞培养箱中培养；
4）第二天，换用新鲜完全培养基继续培养。
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文献和实验相关实验
大鼠腹腔注射麻醉后，将大鼠固定于手术台上，上腹中线偏左约 3-4mm 切开腹壁，逐层切开皮肤、肌肉及腹壁各层，暴露左侧输尿管，在距输尿管膀胱暴露并分离左侧输尿管，用 5-0 丝线结扎两道，上一道结扎点位于左肾下极水平，在两道结扎点中点将输尿管切断，逐层缝合。模型制备完成，后续进行动物肾功能指标的生化检测
输尿管是细长的肌性管道，长约20～30cm，直径0.5～0.7cm，上端与肾盂相连，在腹后壁沿脊柱两侧下行，进入小骨盆，下端在膀胱底的外上方斜行插入膀胱壁，开口于膀胱。在开口处有粘膜皱折，膀胱充满时由于膀胱内压力上升，输尿管开口因受压力而关闭，可以防止尿液向输尿管倒流。输尿管壁由三层组织组成，由内向外为粘膜、平滑肌层和外膜。输尿管平滑肌有缓慢地收缩和舒张的蠕动，使尿液向膀胱方向推进。
脊椎动物成体从肾脏将尿排出体外的管。在无羊膜类是来自中肾输管，在羊膜类从中肾输管的分枝，新生的后肾输管即尿管芽（ureteric bud）而来的。狭义的概念只适用于羊膜类，无羊膜类的输尿管叫做原输尿管（primitive ureter）。羊膜类中的哺乳类的输尿管随着膀胱的发生，输尿管与中肾输管（以后的输精管），不相连而直接终止于膀胱。
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