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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 供应商:
上海烜雅生物科技有限公司
- 库存:
12
- 生长状态:
贴壁细胞
- 运输方式:
常温运输/干冰运输
- 细胞形态:
成纤维细胞样
- 英文名:
B16
中文名称:小鼠黑色素瘤细胞
简称:B16
细胞培养条件:RPMI-1640+10% FBS
生长特性:□ 贴壁 □悬浮 □半悬浮半贴壁
形态:成纤维细胞
来源:ECACC
是否通过STR鉴定:□是
背景资料:该细胞源于C57BL/6J小鼠黑色素瘤,可以产生黑色素,同基因小鼠体内移植可成瘤
本产品仅供科研!
B16小鼠黑色素瘤细胞使用方法:
1、您收到细胞后,请按照以下方法进行操作:
取出15ml离心管,75%酒精擦拭培养瓶,拆下封口膜,放入37℃,5%CO2细胞培养箱中静置2-3小时以稳定细胞状态,然后离心换用新鲜完全培养液继续培养或进行传代。
2、细胞传代:
待细胞达到一定密度(不超过1x10^6/ml)可按照以下方法换液培养或传代。
方法①:收集细胞,1000rpm离心5min,弃去上清液,补加1-2mL培养液后吹匀,将细胞悬液按1:2到1:3的比例分到新的含8ml培养基的新皿中或者瓶中。
方法②:可选择半数换液方式,弃去半数培养基后,将剩余细胞悬起,将细胞悬液按1:2到1:3的比例分到新的含8ml培养基的新皿中或者瓶中。
3、细胞冻存:
1)将细胞悬液转移至15ml离心管中,1000rpm离心5min;
2)用适量的冻存液(FBS:DMSO=9 :1)重悬细胞,并放置于冻存管中;
3)先将细胞冻存管放置于-20℃ 1.5h,然后将其移入-80℃过夜,24h后转入液氮中进行长期保存。使用程序降温盒可直接放入-80℃。
4、细胞复苏:
1)从液氮中取出细胞冻存管(注意:佩戴防爆管面具),快速将其置入37℃水浴中解冻,直至冻存管中无结晶,然后用75%的酒精擦拭冻存管外壁;
2)将冻存管中的细胞移至含10ml完全培养基的15ml离心管中, 1000rpm离心5min;
3)弃上清,沉淀用5ml完全培养基重悬,接种25cm2培养瓶,于37℃,5%CO2细胞培养箱中培养;
4)第二天,换用新鲜完全培养基继续培养。
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文献和实验细胞增殖快非常好养,但是要及时换液,否则也很容易死亡、或变形。我养的最好的时候,天天都在换液,两三天就要消化传代。我用的消化液一般是 消化用含EDTA的胰酶0.25%,个人感觉效果比较好一点。消化步骤:吸出培养液,加入PBS洗涤(视培养瓶大小加入相应的量,25CM加入1-2ML)而后加一次胰酶(25CM培养瓶加0.6ML)作用2-3分钟,轻轻摇晃使均匀作用在细胞层面上。要一直在显微镜下观察,以防消化过头,等细胞从梭形变成椭圆形(或是棱角变钝),本来连成片的细胞之间开始有小小的空间,细胞与细胞
B16鼠黑色素瘤细胞。好像这株细胞还有亚型的,不过中科院说不清,我也就说不清了。总之是B16。细胞总的来说比较好养,操作基本都是常规的。要求用胎牛10%1640、5%CO2、37度培养,一段时间为了省钱用过新生牛也不错。但是传代多了,细胞有形态改变。可以弃掉重新复苏。血清国产的杭州四季青,感觉不灭活比灭活要好养一些。传代操作,主要是无菌操作。细胞增殖快非常好养,但是及时换液,否则也很容易死亡、或变形。消化用胰酶0.25%,可以用含EDTA的,效率更高一点。消化步骤:弃血清——用D-hank's
「没爹」小鼠来了!科学家只用 1 个卵细胞培育出健康小鼠,还可正常繁殖后代
mammalian oocytes 的研究论文,通过基因编辑技术,他们探索了靶向表观遗传改造是否可以改善哺乳动物的孤雌生殖。他们的研究结果证明,在对 ICRs 进行基因编辑改造之后,能够直接从单个未受精的小鼠卵母细胞产生可存活的足月后代。 本研究报道的哺乳动物的孤雌生殖,是单性生殖的重要科学进步。 图片来源:PNAS 主要研究内容 研究人员指出,由于基因组印记的存在,先前旨在产生哺乳动物孤雌生殖后代的研究工作均失败了。因此,研究人员首先采用了不同的方法尝试去克服这个问题。 他们从雌性小鼠身上取出
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