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RNase抑制剂(鼠源)

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  • SY0266-ULG
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  • 2025年07月08日
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    • 英文名

      Murine RNase inhibitor(40U/μl)

    • 保质期

      长期

    • 供应商

      北京百奥莱博科技有限公司

    • 保存条件

      -20℃

    • 规格

      2KU|10KU|20KU|100KU

    RNase抑制剂(RNase inhibitor)是人的胎盘中存在的一种特异性核糖核酸酶(RNase)抑制剂,能够特异地与RNase以非共价键结合形成复合体从而使RNase失活。该产品是以可溶形式在大肠杆菌中表达纯化的重组鼠源RNase抑制剂,能够广泛抑制各种RNase (RNase A,B,C),此外经过RT-PCR、RT-qPCR检验,本品能与Reverse Transcriptase、M-MLV (H-) Reverse Transcriptase以及各种DNA Polymerase兼容。与人源RNase inhibitor相比,本品不含人源蛋白中的两个对氧化非常敏感的半胱氨酸,因而具有更高的抗氧化活性,且更加适合于对高DTT敏感性实验(如qPCR)。

    该产品可用于cDNA第一链合成、多核糖体的分离(Polysome isolation)、体外转录和体外无细胞翻译系统。

    活性定义:抑制5ng RNase A活性的50%所需要的酶量定义为1个活性单位(U)。RNase A的活性通过水解Cyclic 2,3-CMP生成3-CMP定量求得。

    质量控制:
    核酸外切酶残留检测:200U本品和0.6μg λ-Hind III在74℃下反应1小时,DNA的电泳谱带不发生变化。
    核酸内切酶残留检测:200U本品和0.6μg Supercoiled pBR322 DNA在74℃下反应1小时,DNA的电泳谱带不发生变化。
    大肠杆菌残留DNA残留检测:50μL体系中,加入200U本品,以ddH2O为模板,扩增E.coli 16 s rDNA基因。35个循环后进行1%琼脂糖凝胶电泳,EB染色,无扩增条带。

    储存条件:-20℃,有效期2年。

    应用实例

    1.在RNase free离心管中配制如下混合液:
    RNase free ddH2O to 20μL
    5×Buffer 4μL
    Oligo (dT)18?(50μM) 1μL
    dNTP Mix (10mM each) 1μL
    RNase Inhibitor (40U/μl) 1μL
    Reverse Transcriptase (200U/μl) 1μL
    模板RNA 10pg~2.5μg

    2.轻轻混匀。
    3.50℃ 45min,70℃ 15min。
    4.产物于-20℃保存。

    注意事项
    1)为了您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套操作。
    2)抑制RNase活性的pH值范围较广,在pH7~8时表现最大活性。
    3)起泡或剧烈搅拌(Vortex等)会引起失活。
    4)不抑制RNase H活性。

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