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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 细胞类型:
大肠杆菌
- 供应商:
北京百奥莱博科技有限公司
- 库存:
330
- 英文名:
E.coli 2738 Strain
- 运输方式:
干冰运输
- 规格:
1 mL
特别提示:包括大肠杆菌ER2738菌种在内,本公司的所有产品仅可用于科研实验,严禁用于临床医疗及其他非科研用途!
产品名称:大肠杆菌ER2738菌种
英文名称:E.coli 2738 Strain
产品货号:BTN12-234y
产品规格:1 mL
大肠杆菌ER2738菌种是K-12系大肠杆菌,主要用于噬菌体展示。
产品特点:
1.缺失McrB甲基化依赖的限制系统,故可以用CG位点甲基化的DNA转化此菌种。
2.缺失EcoK识别功能,相当于EcoK修饰和限制系统缺失,可以被Eco位点甲基化或未甲基化的DNA转化,制备非甲基化的DNA。
3.允许蓝白斑筛选,有利于转化子的快速筛选。
4.琥珀抑制突变允许携带琥珀突变的质粒和噬菌体生长。
5.具有四环素抗性。
基因型:
大肠杆菌2738菌种基因型是:K-12,[F" proAB lacIqZΔM15 Tn10(Tetr)],fhuA2,glnV,Δ(lac-proAB)5,Δ(hsdSMR-mcrB)5,thi-1。
大肠杆菌ER2738基因型符号及其含义列表如下:
| 基因型 | 表现型 |
| K-12 | K-12系的所有菌种默认都携带F因子和λ、e14、rac三种原噬菌体。其中的e14携带野生型mcrA基因,其产物可对甲基化的CG切割。 |
| [F′proAB lacIqZΔM15 Tn10(Tetr)] | 本菌种的F因子还携带proAB lacIqZΔM15 Tn10。其中野生型的proAB可合成脯氨酸;lacIq使lacI抑制蛋白过表达,对lac启动子的抑制加强,降低背景表达;ZΔM15又叫lacZ △M15,编码β-半乳糖苷酶基因ω片段,与携带α片段的质粒互补可恢复酶活性,用于蓝白斑筛选;Tn10转座子带四环素抗性 |
| fhuA2 | 铁转运受体蛋白,跟TonA协作转运铁,缺失的表现型同tonA |
| glnV | 此菌株缺失λ原噬菌体 |
| Δ(lac-proAB) | 染色体上的lac操纵子到proAB区域缺失,故不能利用半乳糖、不能合成脯氨酸。(此缺失被该菌种F"携带的野生型lac和proAB纠正) |
| Δ(hsdS-mcrB)5 | hsdS缺失使细菌的EcoK系统的Eco位点识别能力缺失,甲基化修饰和限制功能均失。mcrB缺失使细菌丧失对CG中甲基化C的切割 |
| thi-1 | 不能合成硫氨(维生素B1) |
保存条件:-80℃,有效期一年
我公司销售的大肠杆菌ER2738菌种北京品牌,大肠杆菌ER2738菌株质量上佳,价格普惠,欢迎广大新老客户踊跃订购。
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文献和实验的试管中,挑选新鲜的大肠杆菌ER2738单菌落,37℃、230r/min振荡培养过夜,将2m1ER2738培养液转入20m1 LB溶液中继续培养50min,然后37℃、100r/min振荡培养15min,即成为感受态细胞。加入噬菌体后,继续37℃、100r/min培养10min,再转到37℃、230r/min的条件下继续培养4.5h,培养物于4℃、8 000r/min离心15min,取上清液加入1/6体积的PEG―NaCl于4℃沉淀过夜。将溶液于4℃、10 000 r/min离心20min,弃
实验动物、噬菌体肽库和细胞株 实验用荷瘤裸鼠购自上海实验动物中心,噬菌体12肽文库及大肠杆菌ER2738购自美国NewEnglandBiolab公司,人源肝癌细胞BEL―7402、正常肝细胞HL―7702购自中国科学院上海生物化学及细胞生物学研究所细胞库。 2.试剂 RPMI―1640培养基购自美国GIBCO公司,小牛血清购自杭州四季青公司;PEG―8000购自美国Amresco公司,兔抗M13噬菌体血清由澳大利亚CSIRO动物健康研究
来还是有那么一点发红,硬着头皮用于转化,结果有转化子长出来,只是转化效率很低,打算下次115° 20min 试一试) 从-80°取菌种,划线,30° 培养3天,长出了很多克隆。酵母的克隆与大肠杆菌克隆相比,更大,乳白色,看起来表面光滑而湿润,把平板用封口膜封好,4°冰箱保存,防止霉菌污染。 第一次尝试转化实验,转化效率不高,T(SD/-Leu)1:10长出大概不到50个克隆,而另外两个质粒的转化子更差,还有个奇怪的现象,2天的时候克隆直径不到2MM,还是乳白色的,长到第3天后居然变成粉红色的了,有的板
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