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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 细胞类型:
大肠杆菌
- 供应商:
北京百奥莱博科技有限公司
- 库存:
284
- 英文名:
E.coli 2738 Strain
- 运输方式:
干冰运输
- 规格:
1 mL
特别提示:包括大肠杆菌ER2738菌种在内,本公司的所有产品仅可用于科研实验,严禁用于临床医疗及其他非科研用途!
产品名称:大肠杆菌ER2738菌种
英文名称:E.coli 2738 Strain
产品货号:BTN12-234y
产品规格:1 mL
大肠杆菌ER2738菌种是K-12系大肠杆菌,主要用于噬菌体展示。
产品特点:
1.缺失McrB甲基化依赖的限制系统,故可以用CG位点甲基化的DNA转化此菌种。
2.缺失EcoK识别功能,相当于EcoK修饰和限制系统缺失,可以被Eco位点甲基化或未甲基化的DNA转化,制备非甲基化的DNA。
3.允许蓝白斑筛选,有利于转化子的快速筛选。
4.琥珀抑制突变允许携带琥珀突变的质粒和噬菌体生长。
5.具有四环素抗性。
基因型:
大肠杆菌2738菌种基因型是:K-12,[F" proAB lacIqZΔM15 Tn10(Tetr)],fhuA2,glnV,Δ(lac-proAB)5,Δ(hsdSMR-mcrB)5,thi-1。
大肠杆菌ER2738基因型符号及其含义列表如下:
| 基因型 | 表现型 |
| K-12 | K-12系的所有菌种默认都携带F因子和λ、e14、rac三种原噬菌体。其中的e14携带野生型mcrA基因,其产物可对甲基化的CG切割。 |
| [F′proAB lacIqZΔM15 Tn10(Tetr)] | 本菌种的F因子还携带proAB lacIqZΔM15 Tn10。其中野生型的proAB可合成脯氨酸;lacIq使lacI抑制蛋白过表达,对lac启动子的抑制加强,降低背景表达;ZΔM15又叫lacZ △M15,编码β-半乳糖苷酶基因ω片段,与携带α片段的质粒互补可恢复酶活性,用于蓝白斑筛选;Tn10转座子带四环素抗性 |
| fhuA2 | 铁转运受体蛋白,跟TonA协作转运铁,缺失的表现型同tonA |
| glnV | 此菌株缺失λ原噬菌体 |
| Δ(lac-proAB) | 染色体上的lac操纵子到proAB区域缺失,故不能利用半乳糖、不能合成脯氨酸。(此缺失被该菌种F"携带的野生型lac和proAB纠正) |
| Δ(hsdS-mcrB)5 | hsdS缺失使细菌的EcoK系统的Eco位点识别能力缺失,甲基化修饰和限制功能均失。mcrB缺失使细菌丧失对CG中甲基化C的切割 |
| thi-1 | 不能合成硫氨(维生素B1) |
保存条件:-80℃,有效期一年
我公司销售的大肠杆菌ER2738菌种北京厂家,大肠杆菌ER2738菌株质量上佳,价格普惠,欢迎广大新老客户踊跃订购。
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文献和实验的试管中,挑选新鲜的大肠杆菌ER2738单菌落,37℃、230r/min振荡培养过夜,将2m1ER2738培养液转入20m1 LB溶液中继续培养50min,然后37℃、100r/min振荡培养15min,即成为感受态细胞。加入噬菌体后,继续37℃、100r/min培养10min,再转到37℃、230r/min的条件下继续培养4.5h,培养物于4℃、8 000r/min离心15min,取上清液加入1/6体积的PEG―NaCl于4℃沉淀过夜。将溶液于4℃、10 000 r/min离心20min,弃
实验动物、噬菌体肽库和细胞株 实验用荷瘤裸鼠购自上海实验动物中心,噬菌体12肽文库及大肠杆菌ER2738购自美国NewEnglandBiolab公司,人源肝癌细胞BEL―7402、正常肝细胞HL―7702购自中国科学院上海生物化学及细胞生物学研究所细胞库。 2.试剂 RPMI―1640培养基购自美国GIBCO公司,小牛血清购自杭州四季青公司;PEG―8000购自美国Amresco公司,兔抗M13噬菌体血清由澳大利亚CSIRO动物健康研究
临床病历回顾性调查进行临床符合性判断。 二、方法 1.常规血培养的操作 按仪器厂家的说明书进行。培养温度为36℃,培养到第5天,如未出现阳性结果,发培养阴性报告。当血培养仪显示为阳性时,进行涂片革兰氏染色,并接种固体培养皿进行亚培养。分离细菌的菌种鉴定,按我院常规方法进行鉴定(主要通过MICROSCAN微生物鉴定系统进行菌种鉴定)。 2.判断血培养污染的实验室方案 目前,有一些技术和方法可帮助微生物学家来解释说明阳性血培养的临床重要性,其主要考虑的因素为:细菌的种类
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