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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 供应商:
上海烜雅生物科技有限公司
- 库存:
12
- 生长状态:
贴壁细胞
- 运输方式:
常温运输/干冰运输
- 是否是肿瘤细胞:
是
- 细胞形态:
成纤维细胞样
- 英文名:
U251 MG
中文名称:人神经胶质瘤细胞
简称:U251 MG
细胞培养条件:DMEM+10% FBS
生长特性:□ 贴壁 □悬浮 □半悬浮半贴壁
形态:成纤维细胞样
来源:ECACC
是否通过STR鉴定:□是
背景资料:U-251 MG分离至一位患者的胶质母细胞瘤组织。
本产品仅供科研!
U251 MG人神经胶质瘤细胞使用方法:
1、您收到细胞后,请按照以下方法进行操作:
取出15ml离心管,75%酒精擦拭培养瓶,拆下封口膜,放入37℃,5%CO2细胞培养箱中静置2-3小时以稳定细胞状态,然后离心换用新鲜完全培养液继续培养或进行传代。
2、细胞传代:
待细胞达到一定密度(不超过1x10^6/ml)可按照以下方法换液培养或传代。
方法①:收集细胞,1000rpm离心5min,弃去上清液,补加1-2mL培养液后吹匀,将细胞悬液按1:2到1:3的比例分到新的含8ml培养基的新皿中或者瓶中。
方法②:可选择半数换液方式,弃去半数培养基后,将剩余细胞悬起,将细胞悬液按1:2到1:3的比例分到新的含8ml培养基的新皿中或者瓶中。
3、细胞冻存:
1)将细胞悬液转移至15ml离心管中,1000rpm离心5min;
2)用适量的冻存液(FBS:DMSO=9 :1)重悬细胞,并放置于冻存管中;
3)先将细胞冻存管放置于-20℃ 1.5h,然后将其移入-80℃过夜,24h后转入液氮中进行长期保存。使用程序降温盒可直接放入-80℃。
4、细胞复苏:
1)从液氮中取出细胞冻存管(注意:佩戴防爆管面具),快速将其置入37℃水浴中解冻,直至冻存管中无结晶,然后用75%的酒精擦拭冻存管外壁;
2)将冻存管中的细胞移至含10ml完全培养基的15ml离心管中, 1000rpm离心5min;
3)弃上清,沉淀用5ml完全培养基重悬,接种25cm2培养瓶,于37℃,5%CO2细胞培养箱中培养;
4)第二天,换用新鲜完全培养基继续培养。
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文献和实验摘 要一、人成骨肉瘤MG-63细胞株和成人成骨细胞的培养与分化特性的观察目的:观察人成骨肉瘤MG-63细胞株和正常成人成骨细胞分化的特性。方法:在细胞培养的不同时间,用α-磷酸奈酚法测定碱性磷酸酶(ALP)活性;放射免疫法测定骨钙素(BGP)含量;半定量逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)测I型胶原、MMP-1、TIMP-1基因mRNA表达;Van GieSon氏苦味酸酸性复红染色法染色细胞I型胶原。结果:人成骨肉瘤MG-63细胞株接种培养第7天后I型胶原基因表达较高。MMP-1表达量随时间
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问:手上有U251细胞,pEGFP载体,现在将不带外源基因的载体转u251的效率都很低,10%都没有。所用转染试剂:invitrogen的Lipofectamine 2000和威格拉斯的Vigofect,效率都很低,试过不同细胞密度,不同的DNA和转染试剂的比值,还是不行。各位高人有没有什么建议,另外转染的时候使用有血清的培养基养细胞,不知道影响大不大(说明书上说没有影响),稀释DNA和转染试剂是无血清的培养基,还有就是细胞是很久以前的了,传代较多不知道行不行。答:lipo最好
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