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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 库存:
45
- 细胞形态:
上皮细胞样
- 运输方式:
常温运输/干冰运输
- 生长状态:
贴壁
- 英文名:
HK-2
中文名称:人肾皮质近曲小管上皮细胞
简称:HK-2
细胞培养条件:DMEM/F12+10%FBS
生长特性:□ 贴壁 □悬浮 □半悬浮半贴壁
形态:上皮细胞样
来源:ATCC
是否通过STR鉴定:□是
背景资料:该细胞属源于正常肾的近曲小管细胞,通过导入HPV-16 E6/E7基因而获得永生化。将含有HPV-16 E6/E7基因的重组的逆转录病毒载体pLXSN 16 E6/E7转染外生包装细胞Psi-2,Psi-2细胞产生的病毒再去感染兼嗜性包装细胞系PA317,最后将PA317产生的病毒颗粒导入正常的肾皮质近曲小管细胞。尽管pLXSN 16 E6/E7中含有新霉素抗性,但未用G418筛选转导克隆。Southern和FISH分析显示HK-2细胞来源于单克隆。PCR检测证实HK-2细胞基因组中含有E6/E7基因。
本产品仅供科研!
HK-2人肾皮质近曲小管上皮细胞使用方法:
1、您收到细胞后,请按照以下方法进行操作:
取出15ml离心管,75%酒精擦拭培养瓶,拆下封口膜,放入37℃,5%CO2细胞培养箱中静置2-3小时以稳定细胞状态,然后离心换用新鲜完全培养液继续培养或进行传代。
2、细胞传代:
待细胞达到一定密度(不超过1x10^6/ml)可按照以下方法换液培养或传代。
方法①:收集细胞,1000rpm离心5min,弃去上清液,补加1-2mL培养液后吹匀,将细胞悬液按1:2到1:3的比例分到新的含8ml培养基的新皿中或者瓶中。
方法②:可选择半数换液方式,弃去半数培养基后,将剩余细胞悬起,将细胞悬液按1:2到1:3的比例分到新的含8ml培养基的新皿中或者瓶中。
3、细胞冻存:
1)将细胞悬液转移至15ml离心管中,1000rpm离心5min;
2)用适量的冻存液(FBS:DMSO=9 :1)重悬细胞,并放置于冻存管中;
3)先将细胞冻存管放置于-20℃ 1.5h,然后将其移入-80℃过夜,24h后转入液氮中进行长期保存。使用程序降温盒可直接放入-80℃。
4、细胞复苏:
1)从液氮中取出细胞冻存管(注意:佩戴防爆管面具),快速将其置入37℃水浴中解冻,直至冻存管中无结晶,然后用75%的酒精擦拭冻存管外壁;
2)将冻存管中的细胞移至含10ml完全培养基的15ml离心管中, 1000rpm离心5min;
3)弃上清,沉淀用5ml完全培养基重悬,接种25cm2培养瓶,于37℃,5%CO2细胞培养箱中培养;
4)第二天,换用新鲜完全培养基继续培养。
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文献和实验缺血再灌注损伤(ischemia/reperfusion Injury,IRI)中,细胞衰老的作用具有双重调节功能,调节衰老细胞可能是改善供体肾脏结果的潜在治疗靶点。人脐带间充质干细胞衍生的外泌体(HUMSC-EVs)在免疫调节和组织微环境稳态中起重要作用,能够通过减少氧化损伤、炎症细胞因子表达、抑制细胞凋亡等机制改善肾脏 IRI 的预后。本文旨在研究 HUMSC-EVs 通过抑制肾小管上皮细胞衰老来实现保护肾脏 IRI 的机制,并探讨了 HUMSC-EVs 与达沙替尼(dasatinib)和槲皮素(quercetin)联合
及毒物作用下,可以发生肾小管上皮细胞变性甚至坏死,从而导致泌尿功能障碍。此外,在醛固酮、抗利尿激素(antidiuretic hormone, ADH)利钠激素及甲状旁腺激素作用下,也会发生肾小管的功能改变。 由于肾小管各段的结构和功能不同,故各段受损时所出现的功能障碍亦各异。 (一)近曲小管功能障碍 肾小球滤液中60~70%的钠以等渗形式由近曲小管主动重吸收;同时,近曲小管上皮细胞内分泌H + 以利碳酸氢钠的重吸收。此外,葡萄糖、氨
的结构和功能不同,故各段受损时所出现的功能障碍亦各异。 (一)近曲小管功能障碍 肾小球滤液中60~70%的钠以等渗形式由近曲小管主动重吸收;同时,近曲小管上皮细胞内分泌H+ 以利碳酸氢钠的重吸收。此外,葡萄糖、氨基酸、磷酸盐、尿酸、蛋白质、钾盐等经肾小球滤过后,绝大部分也由近曲小管重吸收。因此近曲小管重吸收功能障碍时,可引起肾小管性酸中毒(renal tubular acidosis)。此外,近曲小管具有排泄功能,能排泄对氨马尿酸、酚红、青霉素以及某些用于泌尿系造影
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