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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 库存:
82
- 保质期:
长期
- 供应商:
北京百奥莱博科技有限公司
- 保存条件:
阴凉干燥
- 规格:
50次|10次
特别提示:包括Gibson 组装 预混液在内,本公司的所有产品仅可用于科研实验,严禁用于临床医疗及其他非科研用途!
产品名称:Gibson 组装 预混液
产品货号:SV1013
产品规格:50次|10次
特性:
增加组装产物的成功率,尤其是组装较大或数量较多的片段
灵活的序列设计,无需克隆位点
无需 PCR 纯化步骤
1 小时内完成复杂的组装过程
DNA 可立即进行转化,或作为 PCR 或 RCA 的模版
概述:该产品是由 J.Craig Venter 研究所的 Daniel Gibson 博士及其同事发明,由基因组合成公司(Synthetic Genomics)授权予 我公司。不论是片段的长短或末端的相容性,它都可以成功组装多个 DNA 片段。该产品可以在一管内,恒温条件下,有效的连接多个带有重叠序列的片段,Gibson 组装预混液在同一反应缓冲液中有三种不同的酶活性:
• 外切酶活性会产生单链 3´ 突出端,促使互补的末端退火
• 聚合酶活性会填补退火片段的缺口
• 连接酶活性能将组装后的 DNA 切刻处进行连接
Gibson 组装预混液包括:
- Gibson 组装预混液
- NEBuilder 阳性对照
质保声明:
Gibson 组装预混液经过严格的质控检测,确保该产品具有zuì高的活性和纯度。
我公司销售的Gibson 组装 预混液北京品牌,质量上佳,价格普惠,欢迎广大新老客户踊跃订购。
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文献和实验,扩增目标片段 扩增片段与线性化载体、组装预混酶混合反应 转化感受态细胞 · Step 1 · 如果载体上正好有合适插入目标片段的酶切位点,酶切载体使之线性化。为了降低单酶切载体不完全的几率,减少载体自连和提高筛选成功率,强烈建议双酶切——后面一个切点只要距离第一个切点 5 个碱基以上就行(主要是给两个酶留出结合空间)。如果没有合适的酶切位点,根据选定插入位点设计引物,用反向 PCR 来获得线性化载体。在多片段组装克隆的世界里,凡是酶切搞不定的,统统 PCR 引物设计搞定。简单粗暴有效。 ·
短片段(5kb 以内)的序列克隆成功率。对于提高大片段克隆的成功率,可以从以下几方面考虑: ①选择合适的克隆载体,例如 pCC1-Brick 等适合装载大片段的载体; ②选择合适的克隆方法,通常无缝克隆技术如 Gibson 组装或者 Golden Gate 克隆对于大片段的组装效率更高; ③选择合适的纯化方式,纯化目的基因片段和线性化载体片段后再使用,并且注意两者的使用比例; ④选择合适的大肠杆菌感受态细胞,例如 stbl3,JM109 等; ⑤挑选单克隆菌落时需要注意,成功重组大片段的阳性单克
Nature:陈玲玲团队发现核仁新结构调控核糖体 RNA 末端加工重要机制
RNA 稳态监控系统在核仁发挥活性 这项研究工作利用超高分辨率生物成像、单分子 RNA 成像、RNA 二级结构解析以及动物模型等多种研究手段,全面揭示了核仁精细结构与 pre-rRNA 的加工相互协同,共同维持核仁内微环境稳定,为认识核仁功能提供了全新的见解。此外,该研究证明了 URB1 这类非流动性蛋白质在核仁液-液相分离环境中的关键组织作用,为深入理解三维 pre-rRNA 加工机制、核仁组装形成和功能提供了新的思路。 核仁蛋白质协同核仁精细结构与 pre-rRNA 加工的新机制 中科
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