细胞核膜蛋白提取试剂盒价格

特别提示：包括细胞核膜蛋白提取试剂盒在内，本公司的所有产品仅可用于科研实验，严禁用于临床医疗及其他非科研用途！

产品名称：细胞核膜蛋白提取试剂盒
英文名称：Cell nuclear membrane protein extraction kit
产品货号：HR0149
产品规格：50T|100T

核膜蛋白提取试剂盒提供全套试剂，适用于从各种原代或传代细胞和各种实体组织(如脑、脊髓、神经结或纤维、脂肪、肝脏、消化道、肾脏、心脏、肌肉、血管、结缔组织等动物组织)中提取细胞核的膜蛋白。
本试剂盒含有的独特配方能有效溶解细胞核膜组份，本试剂盒含有的蛋白酶抑制剂混合物能有效阻止蛋白酶对蛋白的降解，以保障提取高纯度的蛋白。
本试剂盒提取的蛋白为具有天然构象的活性蛋白，可用于Western Blotting、蛋白电泳、免疫沉淀、ELISA、转录活性分析、Gel shift凝胶阻滞实验、、酶活性测定等下游蛋白研究实验。
本试剂盒中不含有EDTA，与金属螯和层析等下游应用兼容。
本试剂盒提取的蛋白含有高浓度的盐成分，不可直接用于2D电泳，如下游实验需要直接用于等电聚焦、双向电泳，请使用百奥莱博其他货号的试剂盒。也可以将zuì后样品除盐后再用于2D电泳，可用我公司的蛋白脱盐柱脱盐处理(HR0389)。

储存条件：蛋白酶抑制剂未开盖之前也可以2～8℃保存，开盖后-20℃保存。
有效期：12个月。
应用范围：本试剂盒仅供科研实验使用，不得用于诊断、治疗及其他非科研用途。
产品更新：百奥莱博会更新或升级产品，以优化或增强其使用性能，产品说明书会相应的更新。使用产品时请参照试剂盒中附带的纸质说明书，不能参照网上下载的说明书，可能会是不同版本。
使用安全：试验时需穿着合适的试验时外套，佩戴一次性手套。避免皮肤或粘膜接触试剂。如果不小心接触，应立即用清水冲洗。
试剂盒特点：
1.使用方便，从细胞中提取蛋白不需经过研磨、反复冻融、超声破碎等前处理。
2.将蛋白提取的时间缩短至1小时。
3.含蛋白稳定剂，提取的蛋白稳定。
4.紫外检测蛋白浓度时，背景干扰低。
5.蛋白酶抑制剂抑制了蛋白的降解，蛋白酶抑制剂配方优化。蛋白酶抑制剂混合物包含6种独立的蛋白酶抑制剂；每一种抑制剂可特异性抑制某一种或几种蛋白酶活性。该混合物优化的组成使其可以抑制几乎所有重要的蛋白酶活性，包括丝氨酸蛋白酶、半胱氨酸酸蛋白酶、天冬氨酸蛋白酶、丙氨酰-氨基肽酶等。

注意事项：
1.正式试验前请选取几个样本做预实验，以优化实验条件，取得zuì佳实验效果。
2.螺旋盖微量试剂管装的试剂在开盖前请短暂离心，将盖和管内壁上的液体离心至管底。
3.禁止与其他品牌的试剂混用，否则会影响使用效果。
4.样品和试剂均应避免被真菌、细菌及其他试剂交叉污染。
5.尽量使用一次性的吸头、管、瓶或其他玻璃器皿，重复使用的器皿用前需彻底清洗干净。
6．实验完成后所有样品、废液及接触过的器皿应按照规定程序处理。

试剂盒以外自备试剂和仪器：
● 移液器、吸头 ●离心机及离心管、吸头
● 振荡器、涡旋混匀器 ●冰箱，冰盒
● PBS配方：8mM Na2HPO4、2mM KH2PO4、137mM NaCl、3mM、KCl、pH7.4
使用注意事项：
1．实验中的所有试剂须预冷，所有器具须放-20℃冰箱预冷，整个过程须保持样品处于低温。
2．蛋白酶抑制剂储存期间溶液如果出现沉淀，不影响使用，溶解后正常使用。
3.可以根据自己实验需要加入其它蛋白酶抑制剂单品。

使用方法：
1．提取准备：
每500μl冷的提取液A和B中分别加入2μl蛋白酶抑制剂混合物，混匀后置冰上备用。
注意：
a.根据需处理的样品量准备蛋白提取液，蛋白酶抑制剂混合物不可以一次性全部加入提取液。
b.加过蛋白酶抑制剂的提取液一周内未使用完，再次使用前需重新加入蛋白酶抑制剂。
2．取5～10×106个细胞，在4℃，500g条件下离心2～3分钟，小心吸取培养基，尽可能吸干，收集细胞。
注意：由于核膜蛋白含量较少，需要较多的细胞才能保证得率，因此尽可能加大细胞量。
3．用冷PBS 洗涤细胞两次，每次洗涤后尽可能吸干上清。
4．细胞沉淀中加入400μl冷的提取液A，高速涡旋振荡15秒，置冰上振荡15～30分钟。
注意：
a.提取液A处理后细胞体积应减小，否则延长提取液A振荡处理时间。
b.使用振荡器或摇床的较低转速，保持提取液可轻微晃动即可。
c.没有振荡条件也可不振荡，稍微延长提取液处理时间，中间每隔几分钟用移液器吹打混匀。
5．在4℃，12000g条件下离心5分钟。弃上清，留沉淀。
6．在沉淀中加入300～500μl冷的提取液B，高速涡旋振荡15秒，充分混匀。
7．置2～8℃条件下振荡20～30分钟。
注意：
a.此步骤必须在2～8条件下振荡。
b.使用振荡器或摇床的较低转速，保持提取液可轻微晃动即可。
c.没有振荡条件也可不振荡，置于2～8℃静置，稍微延长提取液处理时间，中间每隔几分钟用移液器吹打混匀。
8．在4℃，12000g条件下离心5分钟。
9．将上清吸入另一干净的离心管，在37℃水浴10分钟。
10．在37℃，1000g离心5分钟。此时溶液分为两层，下层是核膜蛋白约为30～50μl。
注意：
a.此步骤必须在37℃条件下离心。
b.没有37℃离心条件的也可以不离心，稍微延长37℃水浴时间，至液体澄清，分层清晰。
11．此时溶液分为两层，小心吸掉上层，留着备用分析，分离出管底部下层大约30～50μl液体。
注意：
a.下层为核膜蛋白。
b.下层为粘稠状液体。
c.待下游目的核膜蛋白试验完成后再丢弃上层部分。核膜蛋白萃取不完全时此上次部分蛋白仍可以进行再次提取核膜蛋白。
12．用50～200μl冷的溶解液C 稀释该下层核膜蛋白部分，即得细胞核膜蛋白样品。
13．将上述蛋白提取物定量后分装于-80℃冰箱保存备用或直接用于下游实验。
注意：
a.建议用BCA法进行蛋白定量。
b.蛋白样品-80℃存放一年没有问题，避免接触蛋白酶，防止细菌污染。

我公司销售的细胞核膜蛋白提取试剂盒价格，质量上佳，价格普惠，欢迎广大新老客户踊跃订购。