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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 库存:
162
- 保质期:
一年
- 供应商:
北京百奥莱博科技有限公司
- 保存条件:
冷藏
- 规格:
250T|1000T
特别提示:包括Lowry蛋白定量试剂盒在内,本公司的所有产品仅可用于科研实验,严禁用于临床医疗及其他非科研用途!
产品名称:Lowry蛋白定量试剂盒
产品货号:HR0334
产品规格:250T|1000T
在碱性条件下,蛋白质中的肽键与铜结合生成复合物,Folin-酚试剂中的磷钼酸盐-磷钨酸盐被复合物蛋白质中的酪氨酸和苯丙氨酸残基还原,产生深蓝色,在一定的条件下,蓝色深度与蛋白的量成正比,可根据750nm的光吸收值大小计算蛋白质的含量。
储存条件:试剂A、B和Folin-Ciocalteu试剂4℃保存。蛋白标准-20℃保存。
有效期:一年。
使用方法:
A、96孔酶标板测定:
1.工作液C配制。根据样品数量,按50体积试剂A加1体积试剂B(50:1)配制适量工作液C,充分混匀。
2.标准曲线绘制。
3.加入Folin-Ciocalteu试剂振荡混匀后,室温放置30分钟。
4.用酶标仪测定A750,以不含BSA的光吸收值为空白对照。
5.以蛋白含量(μg)为横坐标,吸光值为纵坐标,绘出标准曲线。
6.样品测定:将待测蛋白样品用去离子水稀释至适当浓度,取20μl样品,加入200μl 工作液C,混匀后室温放置10分钟,然后加入20μl Folin-Ciocalteu试剂,混匀后室温放置30分钟。
7.以 0 号孔为对照,测定样品吸收值A750。
8.根据测得的吸收值,在标准曲线上即可查得样品的蛋白含量。
9.计算蛋白浓度:以查得的蛋白含量除以样品体积20μl,再乘以相应的稀释倍数即可得到待测样品的实际浓度。
B.比色皿测定
按照比色皿规格,与以上方法相同,适当按比例增加各溶液体积即可。
注意事项:
1.在低温条件或长期保存出现沉淀时,可搅拌或37℃温育使溶解,如发现细菌污染则应丢弃。
2.许多干扰物质会降低颜色反应。
3.使用孵育时,应注意防止因水份蒸发影响检测结果。
我公司销售的Lowry蛋白定量试剂盒北京现货,质量上佳,价格普惠,欢迎广大新老客户踊跃订购。
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文献和实验目前常用比色法测定样品蛋白的含量:Bradford法(考马斯亮蓝法)、Lowry法(Folin-酚试剂法)、 BCA法等。但各有优缺点,大家可以根据具体情况选取。按相应蛋白质定量试剂盒操作说明操作,测定样品浓度。收集完蛋白样品后,为确保每个蛋白样品的上样量一致,需要测定每个蛋白样品的蛋白浓度。根据所使用的裂解液的不同,需要采用适当的蛋白浓度测定方法。因为不同的蛋白浓度测定方法对于一些去垢剂和还原剂等的兼容性差别很大,大家可以根据具体情况选取。Bradford法(考马斯亮蓝法):考马斯亮蓝G
发光基团pNA游离出来,可通过酶标仪或分光光度计(λ=405nm 或400nm)测定其吸光值,通过测定吸光度来检测Caspase的活性。 二、自备试剂 PBS、蛋白定量试剂盒(Bradford法,选用) 三、实验操作指南 1.准备工作: A、 裂解液溶解后混匀,冰浴备用。 B、 裂解液工作液制备:每50 μL裂解液中加入0.5 μL DTT,冰浴备用。 2.样本处理: A、悬浮细胞 1) 诱导完成后的细胞,2000 rpm离心5 min,弃上清,收集细胞,PBS轻轻重悬细胞并计数
就到 有些抗体有现货,有些抗体没有现货,需要订购。 米宝 只有等着了。。 bianbenjamin 中山金桥,北京的,他们的二抗也是jakson分装的,我个人觉得二抗没有那么关键。 米宝 今天做上了。。问公司要了点进口分装的。。明天看出不出结果了。。晕 米宝 出结果了!结果条带比较杂,但是p-akt还是比较清楚的!另外,出现诡异现象就是,无法解释!糖
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