室温裂解试剂盒 RoomTemp Sample Lysis

1. 应用衔接—PCR扩增

以常温裂解液（Vazyme #P073），血液基因组提取试剂盒（Vazyme #DC111），PK裂解试剂盒（Vazyme #PD101）及竞品T同时处理的3种抗凝剂全血样本为模板，使用PCR试剂（Vazyme# P222）分别扩增300bp/500bp/1kb/2kb的4个片段，进行琼脂糖凝胶电泳检测。结果显示，常温裂解与试剂盒提取具有同等优异且单一的扩增条带，优于PK裂解和竞品。

图1. 4种方式处理全血样本的PCR扩增结果

2. 应用衔接—qPCR探针法定量

以常温裂解试剂盒（Vazyme #P073）与血液基因组提取试剂盒，PK裂解试剂盒及竞品T同时处理的6个抗凝剂全血样本为模板，使用qPCR试剂（Vazyme #Q811）对3个基因体系进行扩增检测。结果显示，△Ct（试剂盒/PK裂解/竞品 - 常温裂解）≥-0.5，常温裂解具有更优的灵敏度和扩增平台。

图2. 4种方式处理全血样本的∆Ct统计结果

图3. 4种方式处理全血样本的扩增曲线

3. 应用衔接— SNP分型

以常温裂解试剂盒（Vazyme #P073）与血液基因组提取试剂盒，PK裂解试剂盒及竞品T同时处理的18个抗凝剂全血样本为模板，使用qPCR试剂（Vazyme #Q811）对2个SNP位点(rs3787728、rs4947963)进行分型效果检测。结果显示，常温裂解与其他3种方式处理的样本均具有一致的良好分型效果。

图4. 4种方式处理全血样本的SNP分型结果

本试剂盒为简单快速的血液室温裂解试剂盒，仅需室温裂解3 min即可从全血样本中释放基因组DNA，且与传统基因组提取方法效果一致。适用于新鲜血液、冻存血液及常规抗凝剂血液（EDTA、枸橼酸盐、肝素钠等），此外还兼容裂解FTA血卡、口腔拭子、植物组织等多种样本。试剂盒包含有快速破坏细胞膜蛋白及膜结构的特殊组分，可以充分释放细胞内的基因DNA；此外还添加了保护蛋白和稳定因子，可以消除裂解样本中的抑制因子对下游qPCR和PCR反应的抑制作用，使裂解后的DNA溶液得以长期稳定储存。裂解后的DNA溶液可直接作为模板，应用于Taqman探针法的SNP检测，qPCR探针法定量，PCR扩增等。