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- 详细信息
- 文献和实验
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- 库存:
30
- 英文名:
胰酶细胞消化液(含EDTA)0.25%;0.02%
- 保质期:
一年
- 供应商:
上海泽叶生物科技有限公司
- 保存条件:
2-8℃保存
- 规格:
100ml
储存条件:2-8℃保存。
有效期:一年。
注意事项:避免反复冻融。
产品简介:
泽叶生物的胰酶消化液是采用高纯度、高品质的胰酶和EDTA进行配制,专门用于细胞或组织的消化。本产品经过过滤除菌,可以直接使用。本产品含0.25% 胰酶和0.02% EDTA。 使用方法:根据需要进行贴壁细胞或组织的消化。
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文献和实验。4. 比色:选择 490 nm 波长,在酶联免疫监测仪上测定各孔光吸收值,记录结果。个人心得体会1. 细胞消化、接种数量:注意消化和数量,消化和数量,消化和数量(重要的事情说三遍)。从我个人的实验经验来看,这是重中之重。若消化出现问题,则会影响细胞的活性,进而影响 OD 值。对于 MDA-MB-231、MCF-7、HS-578T 等一系列容易消化的细胞,消化时胰蛋白酶中不添加 EDTA,消化时也仅需胰酶浸润数秒即可。然而,对于 SW480 等一系列难以消化的细胞,胰蛋白酶中需添加浓度为 0.25%
问:请问哪位仁兄能告知一下EDTA-胰蛋白酶的配制。急用!多谢!答:1、胰酶是0.25%,这是质量体积比,就是说0.25g胰酶溶于100ml PBS,注意,尽量不要用水来溶,因为要保持渗透压。2、EDTA的工作液溶度是0.02%-0.1%,根据细胞消化的难易程度自己调整。EDTA并不是必须的,容易消化的细胞可不加。EDTA对细胞贴壁性有影响,因此使用时要甚重。如果影响贴壁,但消化时必须要用,那么在用完全培养基终止消化后,可离心弃上清,再加完全培养基培养,可去除EDTA。如果对贴壁没
易造成细胞膜损伤而出现细胞坏死的假阳性,甚至会影响细胞膜上磷脂酰丝氨酸与Annexin V-荧光素的结合从而干扰对于细胞凋亡的检测。同时,胰酶细胞消化液中应尽量不含EDTA,因为EDTA可能会影响Annexin V与磷脂酰丝氨酸的结合。 加入步骤1中收集的细胞培养液,将细胞轻轻吹打下来,转移到离心管内,300 g离心5 min,弃上清,收集细胞,用PBS洗涤细胞一次,轻轻悬浮细胞并计数。 注意:加入细胞培养液非常重要,一方面可以收集已经悬浮的发生凋亡或坏死的细胞,另一方面细胞培养液中的血清
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