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2-8℃
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5年
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/
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100
- 供应商:
上海烜雅生物科技有限公司
- 规格:
斜面/冻干粉
菌种名称:DH10Bac(BmNPV)大肠杆菌菌种
DH10Bac(BmNPV)大肠杆菌菌种订购说明:
我司提供的菌株皆为新培育的,能保证其基本的灵活性和活跃度,客户如需订购可提前下单,这样我们才能百分百地将全新批次产品送到您的手上,本页面可以寻到我司的联系方式,客户需要进一步了解详情的,欢迎致电洽谈!
种子制备的过程:
⒈ 孢子制备
⑴ 放线菌孢子的制备 放线菌的孢子培养一般采用琼脂斜面培养基,培养基中含有一些适合产孢子的营养成分,如麸皮、豌豆浸汁、蛋白胨和一些无机盐等。放线菌斜面的培养温度大多数为28 ℃,少数为37 ℃,培养时间为5~14天。
⑵ 霉菌孢子的制备 霉菌的孢子培养,一般以大米、小米、玉米、麸皮、麦粒等天然农产品为培养基。霉菌的培养一般为25~28 ℃,培养时间为4~14天。
⒉ 种子制备
⑴ 摇瓶种子制备 某些孢子发芽和菌丝繁殖速度缓慢的菌种,需将孢子经摇瓶培养成菌丝后再进入种子罐,这就是摇瓶种子。
⑵ 种子罐种子制备 种子罐种子制备的工艺过程,因菌种不同而异,一般可分为一级种子、二级种子和三级种子的制备。
3.种子培养
⑴ 表面培养法
针对容器内培养基物态又分为液态表面培养和固体表面培养。相对于容器内培养基体积而言,表面积越大,越易促进氧气由气液界面向培养基内传递。
⑵ 固体培养法
固体培养又分为浅盘固体培养和深层固体培养,统称为曲法培养。
(3)液体深层培养
液体深层种子罐从罐底部通气,送入的空气由搅拌桨叶分散成微小气泡以促进氧的溶解。其特点是容易按照生产菌种对于代谢的营养要求以及不同生理时期的通气、搅拌、温度与培养基中氢离子浓度等条件,选择适宜的培养条件。
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文献和实验查、基因筛选及图位克隆有益基因的最好材料,也是永久保存基因资源的最好方法之一。 至于作用就太多了,你自己google一下,发现的是你好多做不了,而不是不知道怎么做? huangyuan62 楼主,请问能交换你的BAC质粒吗?pBACe3.6,pBeloBAC11等都可以。 本人有以下质粒和菌种,可全部用于交换 pET28a,pET32a,pETDsb,pETGST,pETTrx,pTrc—CKS, pGEX4T
系列):高拷贝会导致大片段质粒复制压力大,易丢失或断裂,优先用低拷贝载体(如 pACYC184,拷贝数 10-15)或大片段专用载体(如 BAC 载体 pBeloBAC11,可容纳 100kb 以上片段,在大肠杆菌中稳定存在); ④选择合适的连接方法,比如 Gibson 组装(无缝克隆)的方法更适合 10-20kb 大片段的连接,相比传统的 T4 连接的方法,成功率更高,操作更简便; ⑤选择重组缺陷型感受态,提高大质粒的转化效率,如 Stbl3、DH10B 等,此外转化方式也会影响转化
基因克隆的四大要素(Four Elements for Gene Cloning)
一、受体细胞 :受体细胞的选择是否合适将关系到能否表达,特别是高效表达。首先要注意不同的表达载体与受体细胞的关系,即原核表达载体适合原核细胞,真核载体则适合真核细胞,而农杆菌仅适用于植物细胞。即使大肠杆菌质粒,也应注意选择合适的菌种。例如,当用含有T7 噬菌体启动子的载体表达外源基因时,由于T7 启动子只能被其本身的RNA 聚合酶(T7 RNA 聚合酶)所识别,所以必须使用具有产生T7 RNA 聚合酶能力的受体菌,如:BL21(DE3)、JM109(DE3)。对于一些缺失β-D-半乳糖酶氨
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