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北京索莱宝科技有限公司
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250g
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文献和实验牛肉膏 3g乳糖 12g蔗糖 12g水杨素 2g胆盐 20g氯化钠 5g琼脂 18~20g蒸馏水 1000mL0.4%溴麝香草酚蓝溶液 16mLAndrade指示剂 20mL甲液 20mL乙液 20mLpH7.5制法:将前面七种成分溶解于400mL蒸馏水内作为基础液;将琼脂加入于600mL蒸馏水内,加热溶解。加入 甲液和乙液于基础液内,校正pH。再加入指示剂,并与琼脂液合并,待冷至50~55℃,倾注平板。 注:①此培养基不可高压灭菌。②甲液的配制硫代硫酸钠 34g柠檬酸铁铵 4g蒸馏水 100mL
获细胞,加入适量细胞裂解缓冲液(含蛋白酶抑制剂),冰上裂解 30 min,细胞裂解液于 4 ℃,最大转速离心 30 min 后取上清; 取少量裂解液以备 Western blot 分析,剩余裂解液加 1 μg 相应的抗体加入到细胞裂解液,4 ℃ 缓慢摇晃孵育过夜; 取 10 μl protein A 琼脂糖珠,用适量裂解缓冲液洗 3 次,每次 3 000 rpm,离心 3 min; 将预处理过的 10 μl protein A 琼脂糖珠加入到和抗体孵育过夜的细胞裂解液中 4 ℃ 缓慢摇晃孵育
液 20mL pH7.5 制法 将前面七种成分溶解于400mL蒸馏水内作为基础液;将琼脂加入于600mL蒸馏水内,加热溶解。加入 甲液和乙液于基础液内,校正pH。再加入指示剂,并与琼脂液合并,待冷至50~55℃,倾注平板。 注:①此培养基不可高压灭菌。 ②甲液的配制 硫代硫酸钠 34g 柠檬酸铁铵 4g 蒸馏水
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