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- 2026年02月28日
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pLV-Mito-DsRed2是一个哺乳细胞线粒体定位质粒，含有人细胞色素c氧化酶（Mito）亚基VIII的线粒体靶向序列和密码子优化过的红色荧光蛋白基因的DsRed2。Mito序列与DsRed2的5'末端融合，将Mito-DsRed2融合蛋白靶向宿主细胞的线粒体。由此质粒构建的Mito-DsRed2-HEK293A稳定细胞株表达基因Mito-DsRed2融合蛋白，定位于细胞线粒体，可用于线粒体成像实验或者线粒体定位基因的研究。
构建方法：
用pLV-Mito-DsRed2质粒包装成慢病毒，进行浓缩纯化后，用此慢病毒颗粒感染HEK293A细胞，经过多轮Puromycin筛选而获得稳定表达的细胞株。
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文献和实验Cell：清华俞立团队首次发现迁移体介导的线粒体胞吐，一种新型线粒体质控过程
。图片来源：Cell在中性粒细胞中，该研究首先判断了中性粒细胞产生的迁移体是否含有线粒体。将中性粒细胞分离出来用 Mito-SOX 染色来标记受损的线粒体，然后将这些中性粒细胞注射回小鼠体内，发现确实有许多中性粒细胞产生的迁移体含有 Mito-SOX 信号。其次，通过对血液中分离出迁移体进行鉴定发现大约 87% 的迁移体来自中性粒细胞。通过 TEM 观察发现分离出的迁移体高度均一，并具有迁移体的形态特征，而且许多孤立的迁移体都含有受损的线粒体，这就证明了线粒体胞吐同样能够在体内发生。图片来源
线粒体 mitochondrion， pl．mitochondria
线粒体 mitochondrion， pl． mitochondria 除细菌和蓝藻中不存在之外，在所有动植物（真核生物）的细胞质中均可见到。它是宽约 0.5微米的线状和颗粒状的细胞器（希腊语 mito=线， chondr－ on=粒），其主要功能为呼吸。每个细胞中线粒体的数目因不同细胞而异，在一个肝细胞中约有 2500个，一个植物细胞中有 100— 200个。线粒体含有高浓度的磷脂质和蛋白质，由于其折射率高于周围的细胞质基质，所以，即使在活细胞中用相差显微镜也能观察
盼盼 帮楼主顶一顶！ dongweiguang 帮楼主顶。同时，请问有没有叶绿体的抽提试剂盒呢？ devil19840 个人感觉不如做wb，用线粒体特异性的标记蛋白还有胞浆的标记蛋白做标识。以前用过mito-tricker red，感觉还不错 本文由丁香园论坛提供，想了解更多有用的、有意思的前沿资讯以及酷炫的实验方法的你，都可以成为师兄的好伙伴 师兄微
