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36
- 英文名:
Active Fibronectin Type III Domain Containing Protein 5 (FNDC5)
- 保质期:
一年
- 供应商:
上海晅科生物科技有限公司
- 保存条件:
2-8℃
- 规格:
10ug-5mg
英文名称:Active Fibronectin Type III Domain Containing Protein 5 (FNDC5)
规格:10ug/50ug/200ug/1mg/5mg
物种:Homo sapiens (Human,人)
缓冲液成份:磷酸盐缓冲液(pH7.6, containing 5% trehalose)
性状:冻干粉
等电点:5.0
纯度:> 97%
应用:Cell culture; Activity Assays.
用法:Reconstitute in 20mM Tris, 150mM NaCl (pH8.0) to a concentration of 0.1-1.0 mg/mL. Do not vortex.
储存:2-8°C不超过一个月,-80°C不超过12个月。避免反复冻融。
稳定性:热稳定性以损失率显示。损失率是由加速降解试验决定,具体方法如下:在37°C孵育48小时,没有显著的降解或者沉淀产生。保质期内,在适当的条件下存储,损失率低于5%。
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文献和实验洗涤一次。 2. 将漂洗过的菌体细胞悬浮于缓冲液B中,超声破碎,镜检,破碎率高于95%,离心1500g×30min,收集包涵体沉淀。 3. 将包涵体沉淀用缓冲液Ⅰ、缓冲液Ⅱ、缓冲液Ⅲ分别超声洗涤一次,1500g 离心收集包涵体沉淀。 4. 包涵体的溶解:用含高浓度脲素的缓冲液室温放置30min,然后离心1500g×30min,留上清。将溶解后的蛋白质适当稀释,磁力搅拌,透析过夜。 5. 溶解后的包涵体蛋白可通过亲和层析进一步纯化。
μm膜抽滤后作为样品液。 3、将结合T7·Tag 抗体的琼脂 充分悬起,平衡至室温,装入层析柱中。 4、B/W 缓冲液平衡后样品液过柱。 5、10ml B/W 缓冲液过柱,洗去未结合蛋白。 6、用5ml 洗脱缓冲液过柱,每次1ml,洗脱液用含150μl 中和缓冲液的离心管收集,混匀后置于冰上,直接SDS-PAGE 分析。 7、将洗脱下来的蛋白放入透析袋中,双蒸水透析24hr,中间换液数次。 8、用PEG 20000
、缓冲液Ⅲ分别超声洗涤一次,1500 g 离心收集包涵体沉淀。 4. 包涵体的溶解:用含高浓度脲素的缓冲液室温放置30 min,然后离心1500 g×30 min,留上清。将溶解后的蛋白质适当稀释,磁力搅拌,透析过夜。 5. 溶解后的包涵体蛋白可通过亲和层析进一步纯化。
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