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文献和实验第一部分 Total RNA 的提取 一、 试剂配制 准备工作:1、研钵、5ml/10ml/ 25ml移液管、100ml/250ml量筒、250ml/100ml容量瓶、药匙、 试剂瓶等玻璃制品均用锡纸包裹口部,置于烤箱内,180℃,烤6小时。2、50ml/1.5ml离心管、枪头等塑料制品用0.1‰DEPC水浸泡过夜后,121℃ 20mins 高压灭菌。3、电泳槽及电泳托、梳子用3%双氧水处理。4、常用试剂及其配方:▲DEPC水:在1000ml去离子水中加入100ul DEPC, 静置过夜后高压灭菌
1.仪器设备 低温高速离心机 普通离心机 涡旋混合器 微型研钵 尖底离心管 试管架 微量加液器 微量进样器 2.ABA RIA药盒(南京农业大学产品) (1)磷酸盐缓冲盐水(phosphate buffer saline,PBS,干粉),2瓶。每瓶干粉先用5ml热的蒸馏水溶解,再定容到50ml,即为含有0.1%NaN3 和0.1%明胶的pH
(1)采集外周静脉血10ml,加1.7ml ACD(柠檬酸0.48g、柠檬酸钠1.32g、葡萄糖1.47g、加水至100ml,0.6kg/cm2灭菌30min)抗凝。 (2)将血液放入已灭菌的50ml塑料离心管内,加30mlSTMT[0.32mol/L蔗糖、10mmol/l Tris-HCl(pH7.5)、5mmol/L MgCl2、1%Triton –X 100],轻轻上下振荡至透明,红细胞完全溶解。 (3)冰浴10min,离心,3000rpm,10min。弃上清
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