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- gelatins
- 科研试剂
- JC-A11197
- 上海
- 2025年07月13日
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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 库存：
266
- 适应物种：
人/动物/植物等
- 应用：
用于科研试剂实验
- 检测方法：
elisa法
- 检测范围：
科研试剂
- 供应商：
上海机纯实业有限公司
- 规格：
48T/96T
操作人封闭蛋白8(CLDN8)ELISA试剂盒注意事项说明：
1. 实验严格按照说明书的操作进行，实验结果判定必须以酶标仪读数为准。
2. 酶标包被板开封后如未用完，应立即装入密封袋中加干燥剂保存。
3. 建议所有的标准品、样本和空白对照都做双份检测，取平均值，以减小实验误差。
4. 为避免交叉污染，标准品、样本和空白对照每加一个就要更换一次吸头;酶标工作液、样本稀释液和底物等公共组分，要悬臂加样，不得碰到微孔；不得重复使用封板膜。
实验的基本操作流程
A 包被ELISA板子或使用商品化ELISA板
B 让标本中的抗原/抗体与固相载体上的抗体/抗原结合，形成固相复合物。
C 根据颜色反应的程度进行抗原/抗体的定性或定量。
人封闭蛋白8(CLDN8)ELISA试剂盒血清标本宜在新鲜时检测
如有细菌污染，菌体中可能含有内源性HRP，也会产生假阳性反应；
如在冰箱中保存过久，其中的可发生聚合，在间接法ELISA中可使本底加深。一般说来，在5天内测定的血清标本可放置于4℃，超过一周测定的需低温冰存；
冻结血清融解后，蛋白质局部浓缩，分布不均，应充分混匀宜轻缓，避免气泡，可上下颠倒混和，不要在混匀器上强烈振荡。混浊或有沉淀的血清标本应先离心或过滤，澄清后再检测；
反复冻融会使抗体效价跌落，所以测抗体的血清标本如需保存作多次检测，宜少量分装冰存。保存血清自采集时就应注意无菌操作，也可加入适当防腐剂。
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文献和实验一、原理 植物激素（planthormone）免疫定量主要有放射免疫分析（RIA）和酶联吸附免疫分析（ELISA），由于前者操作上欠安全等原因，目前常采用后一种类型。在ELISA中，抗原抗体反应的检测依靠酶标记物来实现，常用的酶有辣根过氧化物酶和碱性磷酸酯酶。酶可直接标记激素分子，称为酶标植物激素，也可标记于第二抗体（识别抗激素抗体Fc片段的抗体或金黄色葡萄球菌A蛋白），称为酶标二抗。这两类标记物分别用于固相
。 聊完以上那些浅显的基本常识，接下来谈我认为最麻烦的： 首先，抗原抗体识别原理的物理学解释，抗体孵育过程实际上就是一个竞争结合的动力学过程。由于抗原和抗体特异性结合的效率是非特异性结合的数百万——数十 亿倍，所以当特异性抗体与非特异性‘抗体’（不好描述，指添加在抗体稀释液中的封闭蛋白，我们可以把它们看成非特异性的一抗）竞争时，尽管抗体稀释液中封 闭蛋白的浓度是一抗浓度20K：1以上，在碰撞几率相同的条件下，由于时间的积累加孵育过程中反复漂洗（孵育抗体要摇晃，对吧），特异性一抗积累了识别
过高，如何解决? 应该是多因素引起的：封闭不完全、显色过度、洗涤不充分、转移缓冲液或设备有污染、抗体稀释度不对或抗体不纯。 封闭不完全：一抗或二抗只要结合到膜上，就会显色。为了避免非特异性的结合，应用封闭液孵育膜，使所有的空白位点都被封闭蛋白占有。NC膜推荐的封闭液是3%的明胶。在室温孵育1小时。明胶不能再4℃孵育，因为会凝结。如果想在低温封闭的话，可以用3%的BSA 。PVDF膜推荐的封闭液是5%的脱脂奶粉。脱脂奶粉不能与Bio-Rad生物素化的蛋白标准一起使用。脱脂奶粉浓度
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