RNA极速提取试剂盒（5分钟）

本试剂盒采用独特的裂解液，可快速可靠从组织、细胞、抗凝全血、病毒液样本中纯化出高纯度的总RNA。该RNA提取试剂盒是目前国际上操作步骤最少、用时最短的RNA提取试剂盒。应用本试剂盒提取的RNA可直接用于反转录、基因克隆、定量检测、文库构建、杂交等多种分子生物学实验。

产品特点：
1．用时最短：极强的裂解能力使得样品瞬间裂解，组织细胞样品可在5分钟内完成总RNA的提取。
2．超高纯度：该试剂盒采用柱式纯化，获取的RNA A260/A280为2.0～2.2，A260/A230为1.9～2.1。
3．高质量RNA：使用该试剂盒获取的RNA完整性良好。
4．使用安全：无需酚/氯仿抽提，减少了有毒有害物质。
5．操作极简化：只需将样品与裂解液A和B混合，经一步挂柱和洗脱即可获得高质量总RNA。

产品组成：

组分	规格
RNA LB1	6ml
RNA BB2	25ml
Washing Buffer（已含乙醇）	55ml
Nuclease Free H2O	10ml
吸附柱及收集管	50套

保存条件：室温，有效期2年。

RNA极速提取流程图：


样本量及RNA产量：

样本类型	样本量	产量	用时
白细胞(抗凝全血)	1×107个	10～20μg	4min30s
植物材料	10mg	5～20μg	5分钟15s
细胞	1×107个	8～15μg	4min30s
肌肉/脑等组织	10mg	3～10μg	5分钟15s
肝脏组织	10mg	10～20μg	5分钟15s
血清和病毒	150μl	0.5～5μg	4min45s

应用实例：

图：应用百奥莱博RNA极速提取试剂盒(5分钟)分别提取的Hela细胞(a)、人心肌组织(b)、新鲜杨树叶的总RNA(c)。

操作方法：

一、裂解/上柱(1.5ml EP管中处理)

细胞(＜10⁷)：胰酶消化完毕后，离心收集细胞沉淀，用20～30μl水或PBS重悬细胞沉淀（务必重悬充分）。加入120μl RNA LB1 漩涡混匀 30s(有未溶解的细胞团块要吹打，助溶解)，加入500μl RNA BB2上下颠倒混合均匀，倒入吸附柱中。13000rpm离心30s，倒掉废液，进行后续洗涤/洗脱步骤。

组织样品(＜10mg)：用液氮研磨粉碎，加入到150μl RNA LB1中，漩涡混合均匀1分钟（有块状组织未溶解的，要使用枪头吹打，助消化）。13000rpm离心15s，吸取120μl上清到新的EP管中，加入500μl RNA BB2上下颠倒混合均匀，倒入吸附柱中。13000rpm离心30s，倒掉废液，进行后续洗涤/洗脱步骤。

病毒液/体液：吸取150μl病毒液/体液样品到加入到120μl RNA LB1中，漩涡混合均匀30s。直接加入500μl RNA BB2中，漩涡混合均匀15s。倒入吸附柱中，13000rpm离心30s，倒掉废液，进行后续洗涤/洗脱步骤。

新鲜抗凝全血：离心管中先加入3ml淋巴细胞分离液，在上层小心加上2～3ml抗凝全血，1500rpm离心15分钟，吸取中间层细胞至1.5ml EP管中。加入1ml生理盐水(或PBS)，4000rpm离心2分钟，去上清，用20～30μl水或PBS重悬细胞沉淀。加入120μl RNA LB1漩涡混匀30s，加入500μl RNA BB2上下颠倒混合均匀，倒入吸附柱中。13000rpm离心30s，倒掉废液，进行后续洗涤/洗脱步骤。

二、洗涤和洗脱
向吸附柱中加入500μl Washing Buffer，13000rpm离心15s。重复此步骤一次。 将吸附柱重新放回离心机，13000rpm空离心1分钟，将残留的乙醇彻底甩干。 将吸附柱芯放入到2ml Nuclease Free收集管中，向吸附柱芯中加入20～50μl Nuclease Free H2O，室温放置1分钟，13000rpm离心1分钟，洗脱液即为提取的RNA，冷冻保存。