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- 百奥莱博
- QN2678-PDY
- 北京
- 2025年07月16日
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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 库存：
314
- 英文名：
ECL Western Blotting Detection Kit(Human IgG)
- 保质期：
三个月
- 供应商：
北京百奥莱博科技有限公司
- 保存条件：
-20℃避光密闭
- 规格：
1kit
特别提示：包括WB化学发光法检测试剂盒(人IgG)在内，本公司的所有产品仅可用于科研实验，严禁用于临床医疗及其他非科研用途！
产品名称：WB化学发光法检测试剂盒(人IgG)
英文名称：ECL Western Blotting Detection Kit(Human IgG)
产品货号：QN2678
产品规格：1kit
SDS-PAGE电泳后，蛋白质按照分子量大小分离，转移到固相载体（例如硝酸纤维素薄膜）后，固相载体以非共价键形式吸附蛋白质，以固相载体上的蛋白质或多肽作为抗原，与对应的抗体起免疫反应，再与酶标记的第二抗体起反应，加入发光底物后，能让胶片感光。经显影和定影后，可以在胶片上显示出条带（抗原所在位置）。
产品内容：
封闭试剂：30g(可配制400ml)。
10倍浓缩抗体稀释液，50ml。
HRP标记二抗，0.3ml，效价1:500～1000。
ECL显色液，25ml A液 + 25ml B液。
保存条件：-20℃避光密闭保存，有效期一年。若经常使用，可将封闭试剂，抗体稀释液和ECL显色液存放于 2-8℃以方便使用。
操作步骤(仅供参考)：
常规电泳转膜后：
1．清洗转印膜：将膜剥离下后，作好标记，一般在左上角剪一缺口。室温用TBS-T漂洗3次每次5min,以尽量洗去转印膜上的SDS，防止影响后面的抗体结合。
2．按5g封闭试剂加100ml双蒸水计，配制膜封闭液，配好的膜封闭液为乳白色悬液，将漂洗过的转印膜放入封闭液内，置摇床孵育，室温封闭30min。用TBS-T缓冲液（pH7.6）洗膜，室温漂洗3次每次5min。
3．将10×抗体稀释液用双蒸水稀释成1×(10ml 10×抗体稀释液加入90ml双蒸水，混匀，可4℃保存三个月)。此稀释液可作为一抗和二抗的稀释液。
4．用1×的抗体稀释液稀释一抗。根据用量以及一抗的推荐稀释浓度来稀释一抗。将杂交膜放入杂交袋中，加入一抗工作液，封口，4℃孵育过夜或37℃摇动孵育2h。此用过的抗体一般可回收第二天再使用一次。
注：如果所加一抗不同，可在此步将膜沿电泳方向剪成条，分别作好标记，分开孵育。
5．用TBS-T 缓冲液（PH7.6）洗膜，室温漂洗3次每次5min。
6．用1×的抗体稀释液稀释二抗。根据用量，按10ml抗体稀释液加入15μl HRP标记二抗的比例，配制二抗工作液。将杂交膜放入杂交袋中，加入二抗工作液，封口，37℃摇动孵育1h。此用过的抗体一般可回收第二天
再使用一次。
7．用TBS-T缓冲液（pH7.6）洗膜，室温漂洗3次每次10min。
8．根据用量，取ECL发光液A、B等量混匀，加在膜正面，暗室显色1～5分种。倾去显色液，小心用纸吸去显色液，在上面盖一层平整的透明纸。再取出感光胶片，做好标记，轻轻的放在膜上，显色30秒到1分钟，取出胶片浸入显影液中，观察显色情况，再放入定影液中1分钟。根据条带强弱，再次感光时可减短或者加长感光时间（从5秒到30分钟）以期达到理想结果。
注意事项：
1．请根据一抗来源选择试剂盒。
2．可以根据显色结果来优化实验反应时间。如背景过深，可延长膜封闭时间，加长zuì终漂洗次数与时间。如果条带过弱，可增加抗体浓度，可延长抗体孵育时间或加长感光时间。
3．TBS-T（0.01M，PH7.6）配制方法：称取NaCl 8.5g，Tris 1.21g，用800ml双蒸水溶解，用盐酸调pH到7.6，再加入0.5ml Tween-20，用双蒸水 加至1000ml，混匀即可。（也可按照自己的配制习惯来配制）
我公司销售的WB化学发光法检测试剂盒(人IgG)北京厂家，质量上佳，价格普惠，欢迎广大新老客户踊跃订购。
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文献和实验发光仪（北京科美东雅生物技术有限公司生产）。 1.3 试剂 乙肝标志物酶法检测试剂由上海科华生物工程股份有限公司提供，批号20080810；化学发光法为北京科美东雅生物技术有限公司提供的配套试剂，批号20081208。 1.4 方法 对上述标本分别用ELISA法和化学发光法进行检测，均严格按照各自的试剂盒说明书操作。 1.5 数据处理 使用SPSS13.0统计软件对两种方法检测结果进行χ 2检验。 2 结果 两种方法对乙型肝炎病毒标志物的对比检测结果见表
条件、时间并进行必要的检测(WB，PCR 等)，确定干预效果最佳的一对小RNA。 步骤三 正式实验，设置合理实验分组，进行瞬时或稳定转染。 步骤四 转染后检测，根据实验要求选择细胞生物学检测、蛋白检测、分子 生物学检测等。以研究小干扰RNA对于细胞、蛋白或基因功能的影响。 RNA干扰检测 细胞检测 细胞增殖毒性MTT 细胞凋亡 细胞周期 细胞迁移 细胞侵袭 蛋白检测 免疫印迹WB 免疫细胞化学ICC 免疫荧光IF 流式
用以定量检测未知标本的抗原浓度（mg/ml或U/ml）。应用这一实验方法可检测正常人群或患者血清中IgG、IgA 及IgM的水平。二、实验材料 2%离子琼脂或生理盐水琼脂（采用0.9%的生理盐水，内含0.1% NaN3）。 标准马抗人IgG血清（抗体）（北京生物制品研究所生产） 工作标准参考蛋白（北京生物制品研究所生产） PBS （pH7.2，0.01M）. 打孔器（孔径3mm）及打孔模板 微量加样器 湿盒（容器内加湿纱布或泡沫塑料） 已制备好的含有1%马抗人IgG
技术资料暂无技术资料 索取技术资料
