植物基因组DNA快速提取试剂盒北京供应商

特别提示：包括植物基因组DNA快速提取试剂盒在内，本公司的所有产品仅可用于科研实验，严禁用于临床医疗及其他非科研用途！

产品名称：植物基因组DNA快速提取试剂盒
英文名称：Plant genomic DNA rapid extraction kit
产品货号：WH0024
产品规格：50次|200次

本试剂盒采用独特的缓冲液系统，适合从各种新鲜或冻存植物材料中提取基因组DNA。无需酚/lǜ仿抽提，使用安全方便，可zuì大限度去除杂质蛋白及细胞中其他有机化合物。对样品的起始重量没有限制，实验者可根据自己的需求灵活调整。提取的基因组DNA片段大，得率高，纯度好，质量稳定可靠。

产品特点：
·简单快速：试剂盒为溶液系统,可在1h内从各种植物组织中快速提取到高质量的基因组DNA。
·无毒害：无需酚/lǜ仿抽提，使用安全。
·材料起始量无限制：实验者可根据实验需求灵活调整样品的起始用量。
·性价比超高：质量好，价格大众化，非常适合样本量大的植物基因组提取。

下游应用：
· PCR、荧光定量PCR与多重PCR。
· RAPD、RFLP、AFLP、SSR等分子标记。
·文库构建、Southern杂交。

不同植物组织DNA提取得率：（样本量：100mg，OD₂₆₀/OD₂₈₀：1.7～1.9）

植物材料	平均DNA产量
拟南芥	3～5μg
小麦	25～32μg
松树	25～32μg
马铃薯	5～7μg
番茄	12～16μg
油菜	2～5μg
烟草	20～30μg
水稻	12～30μg
大豆	20～32μg
玉米	20～32μg

不同来源的植物材料中基因组会有差异，以上所有材料均为新鲜幼嫩叶片。

提取实例：

本试剂盒提取的各种植物基因组DNA电泳结果。
起始量：100mg叶片，100μl洗脱，3μl上样，琼脂糖凝胶浓度为1%，6V/cm，电泳20min，marker为λDNA/Hind III
1：大豆新鲜幼嫩叶片；
2：烟草新鲜幼嫩叶片；
3：小麦新鲜幼嫩叶片；
4：玉米新鲜幼嫩叶片；

试剂盒组成：

组分	50T	200T
缓冲液FP1	25ml	100ml
缓冲液FP2	10ml	40ml
洗脱缓冲液TE	15ml	60ml
RNase A（10mg/ml)	300μl	1.25ml

保存条件：室温（15-25℃）干燥条件下，可保存12个月，更长时间的保存可置于2-8℃。2-8℃保存条件下，若溶液产生沉淀，使用前应将试剂盒内的溶液在室温放置一段时间，必要时可在37℃水浴中预热10min，以溶解沉淀。

注意事项：（请务必在使用本试剂盒之前阅读此注意事项)
1．样品应避免反复冻融，否则会导致提取的DNA片段较小且提取量也下降。
2．缓冲液FP1可能会发黄，并不影响提取效果。
3．若缓冲液FP1或FP2有沉淀析出，可在37℃水浴溶解，摇匀后使用。
4．所有离心步骤均为使用台式离心机，室温下离心。

使用方法：
以下操作步骤为处理100mg新鲜组织或20 mg干重组织时不同溶液的用量，如处理更多量组织，可等比例放大不同溶液的用量。

1．处理材料：
  取植物新鲜组织100mg或干重组织20 mg，加入液氮充分碾磨。
  
  加入400μl缓冲液FP1和6 μl的RNase A（10 mg/ml)，旋涡振荡1 min，室温放置10min。
  注意：由于植物材料多样性非常丰富，所取实验材料的zuì适量需根据材料的不同，或相同材料的不同组织等进行摸索。
2．加入130 μl缓冲液FP2，充分混匀，涡旋振荡1 min。
3．12000rpm （~13400×g )离心5 min，将上清转移至新的离心管中。
4．可选步骤：将上清液再次12000rpm （~13400×g )离心5 min，将上清转移至新的离心管中。
  注意：此步骤目的为去除上清液中的沉淀杂质，使提取基因组DNA纯度更高。
5．向上清液中加入0.7倍体积的异bǐng醇，充分混匀，此时会出现絮状基因组DNA。（例如500 μl的上清液加350 μl异bǐng醇），12000rpm（~13400×g )离心2 min，弃上清，保留沉淀。
6．加入600 μl 70%乙醇，涡旋振荡5 sec，12000rpm（~13400×g )离心2 min，弃上清。
7．重复步骤6。
8．开盖倒置，室温5-10min，彻底晾干残余的乙醇。
  注意：乙醇的残留会影响后续的酶反应（酶切、PCR等）实验。
9．加入适量洗脱缓冲液TE，65℃水浴10-60 min溶解DNA，其间颠倒混匀数次助溶，zuì终得到DNA溶液。

DNA浓度及纯度检测：
1．得到的基因组DNA片段的大小与样品保存时间、操作过程中的剪切力等因素有关。回收得到的DNA片段可用琼脂糖凝胶电泳和紫外分光光度计检测浓度与纯度。
2．DNA应在OD₂₆₀处有显著吸收峰，OD₂₆₀值为1相当于大约50μg/ml双链DNA、40 μg/ml单链DNA。
3．OD₂₆₀/OD₂₈₀比值应为1.7-1.9，如果洗脱时不使用洗脱缓冲液，而使用ddH2O，比值会偏低，因为pH值和离子存在会影响光吸收值，但并不表示纯度低。

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