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BCA蛋白定量试剂盒报价

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  • ¥380 - 3800
  • 百奥莱博
  • WE0276-ZWV
  • 北京
  • 2025年07月08日
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    • 英文名

      BCA Protein Assay Kit

    • 保质期

      长期

    • 供应商

      北京百奥莱博科技有限公司

    • 保存条件

      阴凉干燥

    • 规格

      500次微孔板(50管次)

    特别提示:包括BCA蛋白定量试剂盒在内,本公司的所有产品仅可用于科研实验,严禁用于临床医疗及其他非科研用途!


    产品名称:BCA蛋白定量试剂盒
    英文名称:BCA Protein Assay Kit
    产品货号:WE0276
    产品规格:500次微孔板(50管次)

      BCA蛋白定量法是目前广泛使用的蛋白定量方法之一。本产品是基于BCA(Bicin-choninic Acid)法研制而成,实现了对蛋白质进行快速、稳定、灵敏的浓度测定。其原理是在碱性环境下蛋白质分子中的肽链结构能与Cu2+络合生成络合物,同时将Cu2+还原成Cu+。BCA试剂可敏感特异地与Cu+结合,形成稳定的有颜色的复合物。在562 nm处有高的光吸收值,颜色的深浅与蛋白质浓度成正比,可根据吸收值的大小来测定蛋白质的含量。本试剂盒含有牛血清白蛋白(BSA)溶液作为蛋白质标准品溶液,测定范围为20~2000μg/ml。

    试剂盒组成
    组成 规格
    BCA-A 2×50ml
    BCA-B 3ml
    BSA Standard Solution(2mg/ml) 2ml

    保存条件:BSA Standard Solution:2~8℃,其它组分:室温

    注意事项
    1、本产品可以采用分光光度计(试管检测法)或者酶标仪(微孔检测法)测定蛋白浓度。
    2、建议每次测定蛋白样品时,绘制标准曲线,以获得准确数据。
    3、BSA标准品的稀释液需与待测样品的稀释液一致(可用1×PBS或0.9%生理盐水稀释)。
    4、如待测样品中含较多的干扰物质(具体见附表1),可采用Bradford法蛋白定量试剂盒(WE0275)或其他蛋白定量产品。

    使用方法
    1、稀释BSA标准品:用与待测蛋白样品相一致的稀释液按下表稀释BSA标准品。
    管号 稀释液用量(μl) BSA标准品用量(μl) BSA标准品zuì终浓度(μg/μl)
    A 0 100 2
    B 200 200 1
    C 200 200(从B管中取) 0.5
    D 200 200(从C管中取) 0.25
    E 200 200(从D管中取) 0.125
    F 200 200(从E管中取) 0.0625
    G 200 0 0(空白)


    2、配置BCA工作液:
    1)计算BCA工作液总量:
    BCA工作液总量=(BSA标准品样本个数+未知样本个数)×复孔数×每个样本BCA工作液体积
    举例:BSA标准品样本个数为7个,未知样本个数2个,复孔数3个。
    试管检测法:
    BCA工作液总量=(7个BSA标准品样本+2个未知样本)×3个复孔×2ml/每个样本工作液体积=54ml
    微孔检测法:
    BCA工作液总量=(7个BSA标准品样本+2个未知样本)×3个复孔×200μl/每个样本工作液体积=5.4ml
    2)根据计算出的BCA工作液需要总量,将BCA-A和BCA-B按照50:1的体积比,配制BCA工作液,充分混匀。
    注意:
    a. 由于加样可能存在误差,建议配制BCA工作液时,多配制1-2个孔。
    b. 新配制的BCA工作液室温密封条件下可稳定保存24小时。

    3、定量检测
    ①试管检测法(蛋白浓度检测范围:20-2000μg/ml)
    1)按上表,将稀释好的A-G BSA标准品和待测蛋白样品(原液或稀释液)各100μl分别加到作好标记的试管中。推荐每个测定的样本做2-3个平行反应。
    2)向每个试管中各加入2ml BCA工作液,充分混匀,37℃水浴中孵育30分钟 ,将各管冷却至室温,须在3-5分钟内完成检测。
    3)用分光光度计在562 nm处,测定每个样品及BSA标准品的吸光值,同时做好记录。
    4)绘制标准曲线,计算样品中的蛋白浓度。
    ② 微孔检测法(蛋白浓度检测范围:20-2000μg/ml)
    1)按上表,将稀释好的A-G BSA标准品和待测蛋白样品(原液或稀释液)各25μl分别加到作好标记的96孔板微孔中。推荐每个测定的样本做2-3个平行反应。
    2)每孔加入200μl BCA工作液,充分混匀,盖上96孔板盖,37℃孵育30分钟,冷却至室温,须在3-5分钟内完成检测。
    3)用酶标仪在540-590 nm范围内,测定每个样品及BSA标准品的吸光值,同时做好记录。
    4)绘制标准曲线,计算样品中的蛋白浓度。
    注意:
    a. BCA法测定蛋白浓度时,吸光值会随着时间的延长不断加深。因此所有样品测定需在3-5分钟内完成,否则会影响蛋白定量的准确度。
    b. 建议以去除背景值后的吸光值读数绘制标准曲线。
    c. 由于操作误差导致标准品读数严重偏离线性曲线的应舍去。
    d. 未知样品浓度可以从标准曲线方程中计算得出, 实际浓度需要乘以样品的稀释倍数。
    e. 如果得到的蛋白浓度不在检测范围内,请重新稀释样品后再次测定。

    4、BCA蛋白定量分析结果举例:
    微孔板检测法结果
    蛋白浓度(μg/μl) 原始吸光值 去除背景值后的吸光值
    0 0.086(背景值) 0.000
    0.125 0.123 0.037
    0.25 0.280 0.194
    0.5 0.551 0.465
    1 1.068 0.982
    2 2.000 1.913




    附表1. 干扰物质表
     
    化合物 耐受浓度
    缓冲液
    乙酸盐 0.2M
    甘氨酸 1M
    HEPES 0.1M
    MES 50mM
    MOPS 50mM
    Na+-柠檬酸 <1mM
    PIPES 50mM
    磷酸钠 0.1M
    乙酸钠 0.2M pH 5.5
    TES 50mM
    Tris 0.1M
    盐类
    硫酸铵 干扰
    NaCl 1M
    尿素 3M
    极性化合物
    DMSO 5%
    甘油 10%
    去垢剂和变性剂
    Brij35 1%
    CHAPS 1%
    盐酸胍 4M
    NP-40 1%
    辛葡糖 1%
    SDS 1%
    Triton X-100 1%
    糖类
    葡萄糖 10mM
    蔗糖 1M
    螯合剂
    EDTA 10mM
    还原剂
    β-巯基乙醇 50μM
    DTT 1mM
    其他
    脂类 干扰
    HCl/NaOH 0.1M


    储存条件:2~8℃

    我公司销售的BCA蛋白定量试剂盒报价,质量上佳,价格普惠,欢迎广大新老客户踊跃订购。

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