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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 库存:
160
- 英文名:
Saliva DNA Kit
- 保质期:
长期
- 供应商:
北京百奥莱博科技有限公司
- 保存条件:
于2~8℃,或分装后保存于-20℃
- 规格:
100次
特别提示:包括磁珠法唾液DNA提取试剂盒在内,本公司的所有产品仅可用于科研实验,严禁用于临床医疗及其他非科研用途!
产品名称:磁珠法唾液DNA提取试剂盒
英文名称:Saliva DNA Kit
产品货号:CZ002
产品规格:100次
产品简介:
本产品适用于从唾液样品中快速、高效地提取基因组DNA。提取过程采用超顺磁性微球,无需离心操作;使用预制的缓冲液,可直接进行提取,且可根据加入的样本量来调整反应体系。本产品既可以手动进行少量样品的提取,也适合于用自动化工作站进行高通量操作。提取的产物可用于酶切、PCR扩增、检测等后续实验。
自备试剂及耗材:
● EP管(1.5 mL离心管、2 mL离心管:1个/样品)
● 单通道移液器:200 μL、1000 μL
● 漩涡振荡器
● 恒温金属浴(或水浴锅)
● 磁性分离器:可选用百奥莱博磁性分离器
● 异bǐng醇(AR)
● 乙醇
首次使用前:
● 在Proteinase K干粉中加入指定量(见管身标签)的Solution A,混匀后保存于2~8℃,或分装后保存于-20℃。
● 在Washing Buffer I中加入指定量(见瓶身标签)的无水乙醇(分析纯),混匀后于室温下密闭保存。
● 在Washing BufferⅡ中加入指定量(见瓶身标签)的无水乙醇(分析纯),混匀后于室温下密闭保存。
操作步骤:
以400μL 样本量为例
1. 唾液样本裂解:
1) 向1.5mL离心管中加入400μL唾液样本(若样本体积不足400μL,请加入唾液保存液补齐至400μL)、20μL Proteinase K溶液、以及200μL Lysis Buffer,涡旋混匀。
2) 将离心管于55℃温浴10min,期间每隔5min摇晃混匀一次,完毕后低速瞬离使管盖以及管壁上液体集中到管底,待用。
2.结合:
向上述离心管中加入350μL 异bǐng醇,再加入50μL Magnetic beads,漩涡震荡3min混匀后静置2 min。
3. 磁性分离
将离心管置于磁力架上静置20s至磁珠吸附完全;如果离心管内盖有磁珠,可保持EP管在 磁力架上,整体上下颠倒2~3次至磁珠被完全吸附。保持EP管固定于磁力架上,用移液枪吸 弃上清液,期间避免接触磁珠。
4. 洗涤1
向1.5mL离心管中加入800μL Washing Buffer Ⅰ,将1.5mL离心管从磁力架上取下,用移液枪吹散磁珠,涡旋震荡 2min,磁性分离(参照步骤3操作),再重复此操作1次。
5. 洗涤2
使用800μL Washing BufferⅡ,(参照步骤4操作)
6.干燥:
保持离心管于磁性分离器上,于室温下开盖静置10 min后,取下离心管。
注:干燥过程中若发现反应管中有液体残留时,可用小量程移液器吸弃液体。
7.洗脱:
加入100μL Elution Buffer,漩涡震荡1 min或用移液器缓慢吹打磁珠50次,使磁珠充分重悬,于65℃加热10 min后,将离心管置于磁性分离器上直至溶液澄清,转移上清液至新的1.5 mL离心管中,此即为纯化得到的唾液DNA,可保存于-20℃。
注意事项:
1.操作之前,请务必认真阅读本产品手册。
2.提取效果与样本质量有关,应避免对样本进行反复冻融。
3.应避免对磁珠进行冷冻、离心等操作。
4.磁珠取用前应充分重悬均匀。
5.磁珠干燥前,应用移液器吸尽洗涤液。
6.应避免磁珠过度干燥,否则会严重降低核酸洗脱效率。
7.建议使用质量较好的离心管和移液器吸头,避免因粘附磁珠而造成损失。
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